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聚丙烯凝胶银染之后不显色胶一点反应都没有,完全透明的!1取出电泳后的凝胶,放入染色盒中用蒸馏水洗涤两次.2将蒸馏水倒出,加入25%的乙醇变性3mins.3回收乙醇,用蒸馏水洗涤凝胶一次,加入
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问题描述:

聚丙烯凝胶银染之后不显色

胶一点反应都没有,完全透明的!

1取出电泳后的凝胶,放入染色盒中用蒸馏水洗涤两次.

2将蒸馏水倒出,加入25%的乙醇变性3mins.

3回收乙醇,用蒸馏水洗涤凝胶一次,加入1%的硝酸溶液固定约3mins,待溴酚蓝的蓝色大部分褪尽,停止固定.

4回收硝酸溶液,用蒸馏水洗涤凝胶一次,加入0.2%硝酸银染色约30mins.

.5回收硝酸银溶液,用蒸馏水洗涤凝胶两次,加入含甲醛(0.2%)3%的碳酸钠溶液显色.待凝胶上显出清晰的DNA带型时,适时倒掉碳酸钠溶液,加入10%的乙酸终止显色反应.

6将乙酸倒掉,用蒸馏水清洗两次,放入凝胶成像系统的暗箱中,扫描成像.

不知道是不是碳酸钠过期导致的?

马宏杰回答:
  基本可以确定是你样品或试剂出问题了,不然不会一点颜色都没有,就算条带不清晰,至少加样槽里会有颜色出现.提以下两个建议:一:样品DNA浓度太低,或者电泳前就已经分解掉了.检查办法是,电泳前,用分光光度计测一下DNA含量...
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