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【如图甲、乙,箭头表示限制酶的酶切位点,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,neoR表示青霉素抗性基因.现有MboI、SamI两种限制酶,它们的识别序列和酶切位点分别为↓GATC、CCC↓GGG.据图回答下】
1人问答
问题描述:

如图甲、乙,箭头表示限制酶的酶切位点,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,neoR表示青霉素抗性基因.现有MboI、SamI两种限制酶,它们的识别序列和酶切位点分别为↓GATC、CCC↓GGG.据图回答下列问题:

(1)获取目的基因是基因工程的第一步,目的基因主要是指___,也可以是一些具有调控作用的因子.在目的基因的一条链上,相邻的两个碱基之间依次由___连接.

(2)利用限制酶MboI和SamI分别对甲、乙进行酶切,若用E•coli DNA连接酶进行连接,则可以得到___种重组质粒;若用T4DNA连接酶进行连接,则可以得到___种重组质粒.

(3)要使目的基因在受体细胞中,能正常表达和发挥作用,表达载体必须具备的结构是___.

胡涌回答:
  (1)目的基因主要是指编码蛋白质的基因,也可以是一些具有调控作用的因子.由于目的基因是DNA的片段,所以在目的基因的一条链上,相邻的两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接.   (2)由于E•coliDNA连接酶只能连接双链DNA的黏性末端,而T4DNA连接酶既可以连接双链DNA的黏性末端,又可以“缝合”双链DNA的齐平末端,所以若用E•coli DNA连接酶进行连接,则可以得到1种重组质粒;若用T4DNA连接酶进行连接,则可以得到2种重组质粒.   (3)要使目的基因在受体细胞中,能正常表达和发挥作用,表达载体必须具备的结构是启动子、终止子,此外还有目的基因和标记基因.   故答案为:   (1)编码蛋白质的基因 脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖   (2)1  2   (3)启动子、终止子
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