（2013•江苏一模）构建基因文库是获取目的基因的方法之一．图甲表示cDNA（互补DNA）文库构建过程，其中①～③表示有关操作步骤．图乙表示用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和SalⅠ单独或联合切割图
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问题描述：
（2013•江苏一模）构建基因文库是获取目的基因的方法之一．图甲表示cDNA（互补DNA）文库构建过程，其中①～③表示有关操作步骤．图乙表示用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和SalⅠ单独或联合切割图甲中的质粒DNA分子，经凝胶电泳分离后所得到的图谱．请据图回答下列有关问题：
（1）设计引物是cDNA（互补DNA）文库构建过程的第一步，引物长度一般在15-30个碱基之间，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于TaqDNA聚合酶进行反应．若引物过短则存在______等问题．
（2）图甲过程②、③分别需要在______、______酶的作用下形成cDNA的第一条链、第二条链，这两个过程都需要利用______作为原料．
（3）在⑤和⑦过程中cDNA和质粒DNA的3’端都要各加上一段寡聚核苷酸（20个以下碱基的核苷酸短链），制成______；过程⑧在DNA连接酶的作用下，形成重组DNA．图示这种情况下能形成______种重组DNA，理由是______．
（4）请根据图乙电泳图谱分析各限制酶的酶切位点，并在答题纸的质粒上标出各个限制酶的酶切位点和各位点间的大小．
卢小林回答：
（1）PCR扩增DNA时要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，引物不能过短，否则没有一定的特异性，容易导致配对错误．（2）图甲中②过程是以mRNA为模板合成DNA链过程，该过程需要逆转录酶，过程③是以DNA一...
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