生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗．科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）．（
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问题描述：
生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗．科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）．
（1）用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用___、___方法从油料作物中提取．
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供___，培养基灭菌采用的最适方法是___法．
（3）测定培养液中微生物数量，可选用___法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测___，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用___技术使脂肪酶能够重复使用．
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的___技术．
孙桂荣回答：
（1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应采用压榨法或萃取法提取．
（2）植物油中不含有矿质元素，只为微生物提供碳源；培养基适合用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．
（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数；分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值；可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶．
（4）利用PCR技术可以扩增基因．
故答案为：
（1）压榨 萃取 （注：两者无先后顺序）
（2）碳源 高压蒸汽灭菌
（3）显微镜 酶活性（酶活力） 固定化酶（固定化细胞）
（4）PCR（多聚酶链式反应，聚合酶链式反应）
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