钱树人回答：
一、目的
学习用阳离子交换树脂柱分离氦基酸的操作方法和基本原理.
二、原理
各种氨基酸分子的结构不同,在同一PH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效果.
三、器材
1、20cmX1cm层析管2、试管
3、吸管．4、恒压洗脱瓶
5、部分收集器6、搪磁杯
7、电炉8、分光光度计
四、试剂和材料
1、．苯乙烯磺酸钠型树脂（强酸lx8,l00一200目,可用上海华东化工学院产品）
2、2mol／L盐酸溶液
3、2mol／L氢氧化钠溶液
4、标准氨基酸溶液天冬氨酸、赖氨酸和组氨酸均配制成2mg／mL的0.1M盐酸溶液.
5、混合氢基酸溶液将上述天冬氨酸、赖氨酸和组氨酸溶液按1：2．5：10的比例混合.
6、柠檬酸－氢氧化钠一盐酸冲液（pH5.8）,钠离子浓度0.45M）
取柠檬酸（C6O7H8.H20）14.25g、氢氧化钠9.30g和浓盐酸5．25mL溶于少量水后,定容至500mL,冰箱保存.
7、显色剂2g水合茚三酮溶于75mL乙二醇单甲醚中．加水至100mL.
8、50%乙醇水溶液
五、操作
1、层析柱的准备：将强酸型阳离子交换树脂用氢氧化钠处理成Na+型后洗至中性（处理方法见第三篇实验十二）．搅拌一小时后装成一个直径1cm．高16～18cm的层析柱.
2、氨基酸的洗脱：用PH5.8的柠檬酸缓冲液流洗平衡交换住（装置如图）.调节流速为0.5mL／min,流出液达床体积的4倍时即可上样.由柱上端仔细加人氨基酸混合液0．25—0．5mL,同时开始收集流出液.当样品液弯月面靠近树脂顶端时,即刻加入0.5mL拧檬酸缓冲液冲洗加样品处.待缓冲液弯月面靠近树脂顶端时.再加入0．5mL缓冲液.如此重复两次,然后用滴管小心注入柠檬酸缓冲液（切勿搅动床面）,并将柱与洗脱瓶和部分收集器相连.开始用试管收集洗脱液,每管收集lmL．共收集60一80管.
3、氨基酸的鉴定：向各管收集液中加lmL水合茚三酮显色剂并混匀,在沸水浴中淮确加热15分钟后冷却至室温．再加15mL的50％乙醇液.放置10分钟.以收集液第2管为空白,测定A570nm波长的光吸收值.以光吸收值为纵坐标,以柱洗脱体积为横坐标绘制洗脱曲线.以已知3种氨基酸的纯溶液为样品,按上述方法和条件分别操作,将得到的洗脱曲线与混合氨基酸的洗脱曲线对照．可确定3个峰的大致位置及各蜂为何种氨基酸.
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