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PCR后酶切,凝胶电泳,EB染色,做的胶是一块胶上左右两个半块,每次右边半块不显色或者特别浅就是我做的胶是一块胶上最左边以及胶的中间各插了一个梳子,酶切后同时点样同时跑胶,为什么每
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问题描述:

PCR后酶切,凝胶电泳,EB染色,做的胶是一块胶上左右两个半块,每次右边半块不显色或者特别浅

就是我做的胶是一块胶上最左边以及胶的中间各插了一个梳子,酶切后同时点样同时跑胶,为什么每次都是左边的那块显色很清楚,右边的那块就不清楚,甚至都没法判断条带是否分开了,有人说可能是因为EB跟DNA跑的方向相反,左边的那块上面跑完后EB更多一些,让我们跑完后泡EB溶液,还是没用.因为要加快速度,所以一定是要两边一起跑,请问有无高手知道什么原因怎么解决啊?我只有5个财富,都给了吧.

黄心汉回答:
  看看胶是否水平,电泳是否水平.我怀疑你胶总是左边高,右边矮.   还有,你的电压太高,跑的时间过长,导致胶过热也是原因之一.不要超过100V,一般1%缓冲液跑15-20分钟足够了.   还有一种情况就是,右边的样本都跑出胶了,你看到的是左边的样本跑到右边的胶里面了,最好每跑5-10分钟看一下,以防跑过的可能
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