请回答下列有关胚胎工程和基因工程等方面的问题：（1）利用基因工程可以获得转基因羊．若要使获得的转基因羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶III蛋白，构建基因表达载体时必须把目的基因
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问题描述：
请回答下列有关胚胎工程和基因工程等方面的问题：
（1）利用基因工程可以获得转基因羊．若要使获得的转基因羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶III蛋白，构建基因表达载体时必须把目的基因与___基因的启动子结合，使用该启动子的原因是___．
（2）应用PCR扩增目的基因时，需要在基因组数据库中査询目的基因的___序列，以便合成引物．PCR过程第一轮循环的模板是___．
（3）目前常用的措施是将该基因表达载体导入羊的___细胞，导入方法是___．
（4）体外受精时，需要对精子进行___处理，卵母细胞需要培养至___时期．
沈剑波回答：
（1）若要使获得的转基因羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶III蛋白，构建基因表达载体时必须把目的基因与羊乳腺分泌蛋白基因的启动子结合，启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA，从而让目的基因只能在羊乳腺细胞中表达．
（2）应用PCR扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物．PCR过程第一轮循环的模板是目的基因的两条脱氧核苷酸链（或目的基因）．
（3）将目的基因导入动物细胞常采用的受体细胞是受精卵，方法是显微注射法．
（4）体外受精时对精子要进行获能的处理，卵母细胞也需要培养至减Ⅱ中期才具有受精能力．
故答案为：
（1）羊乳腺分泌蛋白 让目的基因只能在羊乳腺细胞中表达
（2）核苷酸（或脱氧核苷酸） 目的基因的两条脱氧核苷酸链（或目的基因）
（3）受精卵 显微注射法
（4）获能 MII中期（减数第二次分裂中期）
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