某研究性学习小组利用荧光素-荧光素酶生物发光法，测定人参愈伤组织中ATP的含量，以研究人参细胞能量代谢的特点．实验原理：荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下，发出荧光；用分光光
1人问答
问题描述：
某研究性学习小组利用荧光素-荧光素酶生物发光法，测定人参愈伤组织中ATP的含量，以研究人参细胞能量代谢的特点．
实验原理：荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下，发出荧光；用分光光度计可测定发光强度；当荧光素和荧素酶都足量时，在一定范围内，ATP的含量与发光强度成正相关．
实验步骤：
一ATP的提取：称取一定量的人参愈伤组织，研磨后沸水浴10min，冷却至室温，离心，取上清液．
二ATP的测定：吸取一定量的上清液，放入分光光度计反应室内，并注入适量的所需质，在有氧等适宜条件下进行反应，记录发光强度并计算ATP含量．请回答：
（1）步骤一中的沸水浴处理，使酶的___被破坏而失活．
（2）步骤二注入的物质中，属于反应物的是___．分光光度计反应室内能量的转换形式是_______．
（3）荧光素酶价格昂贵，为能准确测定出ATP的含量，又能节省酶的用量，学习小组探究了“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”，实验结果如图．
①学习小组配制了1×10-8mol/L ATP标准液、___和70mg/L的荧光素溶液（过量）溶液进行实验．
②结果表明：图中___点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度．图中e、f、g点所对应的荧光素酶浓度不同，但发光强度相同，这是因为___．
（4）ATP测定对食品卫生监控有重要意义．食品卫生检验人员利用上述生物发光法测定某熟食品样品中细菌的ATP总含量，测算出了细菌的数量，从而判断食品污染程度．做出上述判断的理由是：每个细菌细胞中ATP的含量___．
谭祖国回答：
（1）沸水浴处理时，高温能够使酶分子空间结构被破坏，使酶的活性永久丧失．（2）根据实验原理：荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下，进行反应发出荧光．所以，步骤二注入的物质中，属于反应物的是荧光素，分光光度...
生物推荐
生物推荐
最新更新
精品分类
优秀生物推荐
热门生物
邮箱： 