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【在生物的生长发育过程中,基因是选择性表达的.某真核生物,要想获得极为稀少的mRNA及其克隆,可以用如图所示的差异杂交法.Poly(A)是指位于mRNA上的150-200个腺苷酸残基.请回答下列】
1人问答
问题描述:

在生物的生长发育过程中,基因是选择性表达的.某真核生物,要想获得极为稀少的mRNA及其克隆,可以用如图所示的差异杂交法.Poly(A)是指位于mRNA上的150-200个腺苷酸残基.请回答下列问题.

(1)利用表达目的mRNA的细胞获得放射性标志的探针时,需要用___酶,可以用___作为引物.

(2)用羟基磷灰石柱层析法,回收___(填“未杂交的32P标记的单链DNA”或“杂交分子”),用构建___(填“基因组”或“cDNA”)文库.

(3)在生物的生长发育过程中.由于基因选择性表达导致细胞___,该过程的结果使多细胞生物体中的细胞趋向___,有利于提高各种生理功能的效率.

(4)若用NaOH水解除去mRNA获得的分子与不表达目的mRNA细胞中获得的单链DNA杂交,可能形成杂合双链区和游离的单链区,原因是___.

黄大鹏回答:
  (1)分析图解可知,利用表达目的mRNA的细胞获得放射性标志的探针的过程就是逆转录过程,因此需要用逆转录酶,用Poly(A)作为引物.   (2)根据题意可知“要想获得极为稀少的mRNA及其克隆”,因此用羟基磷灰石柱层析法,回收未杂交的32P标记的单链DNA,由于该DNA是利用mRNA逆转录而来,不包含这种生物的全部基因,因此构建的是cDNA文库.   (3)在生物的生长发育过程中,由于基因选择性表达导致细胞分化,该过程的结果使多细胞生物体中的细胞趋向专门化,有利于提高各种生理功能的效率.   (4)DNA分子中含有内含子、非编码区等序列,mRNA分子中没有互补的碱基序列,仍然为两条游离的单链,所以出现游离单链区.DNA分子中含有外显子序列,mRNA中具有互补的碱基序列,互补碱基序列就会结合在一起,形成杂合双链区,因此用NaOH水解除去mRNA获得的分子与不表达目的mRNA细胞中获得的单链DNA杂交,可能形成杂合双链区和游离的单链区.   故答案为:   (1)逆转录酶    Poly (A)       (2)未杂交的32P标记的单链DNA     cDNA   (3)分化    专门化   (4)DNA分子中含有内含子、非编码区等序列,mRNA分子中没有互补的碱基序列,仍然为两条游离的单链,所以出现游离单链区.DNA分子中含有外显子序列,mRNA中具有互补的碱基序列,互补碱基序列就会结合在一起,形成杂合双链区
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