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为了更好地分解石油,通过基因工程产生超级细菌.下图a表示基因工程中经常选用的载体--pBR322质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因.目的基因如果插入某抗性基因
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问题描述:

为了更好地分解石油,通过基因工程产生超级细菌.下图a表示基因工程中经常选用的载体--pBR322质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因.目的基因如果插入某抗性基因中,将使该基因失活,而不再具有相应的抗性.为了检査载体是否导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌(受体细胞),将大肠杆菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图b的结果(黑点表示菌落).再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图c的结果(空圈表示与b对照无菌落的位置).据此分析并回答:

(1)将重组的DNA分子导人受体细胞时,用___处理大肠杆菌,增大___.

(2)pBR322质粒的化学本质是___,其控制着___等性状.与图c空圏相对应的图b中的菌落表现型是___,由此说明目的基因插入了___中.

(3)基因工程成功的标志是___.

陈丽梅回答:
  (1)将目的基因导入微生物细胞一般采用钙离子转化法,即将重组的DNA分子导人受体细胞时,用氯化钙处理大肠杆菌,增大细胞壁的通透性.   (2)pBR322质粒的化学本质是DNA,分析图解可知,该质粒含有Ampr和Tetr两种抗性基因,控制着抗氨苄青霉素和抗四环素等性状.图b中的菌落能抗氨苄青霉素,图c中的实心圈能抗氨苄青霉素和四环素,所以与图c空圈相对应的图b中的菌落能抗氨苄青霉素,但不能抗四环素,由此说明目的基因插入了四环素抗性基因(Tetr)中.   (3)基因工程成功的标志是目的基因在受体细胞中表达.   故答案为:   (1)氯化钙 细胞壁的通透性   (2)DNA 抗氨苄青霉素和抗四环素 能抗氨苄青霉素,但不能抗四环素 Tetr   (3)目的基因在受体细胞中表达
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