（1）配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液,使用时再分别稀释100倍.分别称取NH4NO3165gKH2PO417gKNO3190gCaCl2·2H2O44gMgSO4·7H2O37g各自配成1L的母液.倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中.（2）配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液.依次称取KI0.083gNa2MoO4·2H2O0.025gH3BO30.62gCuSO4·5H2O0.0025gMnSO4·H2O1.69gCoCl2·6H2O0.0025gZnSO4·7H2O0.86g配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中.CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O由于称取量很小,如果天平精确度没有达到万分之一,可先配成调整液.分别称取CuSO4·5H2O0.05gCoCl2·6H2O0.05g各自配成100ml的调整液,然后取5ml就还有0.0025g的量.（3）配制MS有机母液一般配制成100倍MS有机母液.依次称取肌醇10g盐酸硫胺素（VB1）0.01g烟酸0.05g甘氨酸0.2g盐酸吡哆醇（VB6）0.05g配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中.（4）配制MS铁盐母液一般配制成100倍MS铁盐母液.依次称取EDTA二钠3.73gFeSO4·7H2O2.78g配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中.所以MS母液有5种大量元素母液,加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液,共8种母液.激素母液的配制各种生长素和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加蒸馏水定容.一般取100mg配成100ml母液.2、配制培养基以配置1LMS培养基为例,按顺序进行如下操作：（1）先在烧杯中放入一些蒸馏水.（2）分别取上面八种母液10ml倒入.（3）一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解.（4）加蒸馏水用量筒定溶至1L.（5）按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要.所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差.（6）用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8.（有条件的话使用酸度计,比较精确）可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值.1当量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液.1当量NaOH配制：称取NaOH4g配成100ml溶液.（7）称取5g左右琼脂粉（质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化.（8）稍微冷却后,分装入培养容器中.无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧.（9）放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右.（10）灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固. 　　二、灭菌 　　灭菌是组织培养重要的工作之一.初学者要清楚有菌和无菌的范畴.有菌的范畴是：凡是暴露在空气中的物体,接触自然水源的物体,至少它的表面都是有菌的.依此观点,无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表,如整个消化道、呼吸道,即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的.这里所指的菌,包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其他微生物.菌的特点是：极小,肉眼看不见.无处不在,无时不有,无孔不入.在自然条件下忍耐力强,生活条件要求简单,繁殖力极强,条件适宜时便可大量滋生.无菌的范畴是：经高温灼烧或一定时间蒸煮过后的物体,经其他物理或化学的灭菌方法处理后的物体（当然这些方法必须已经证明是有效的）,高层大气、岩石内部、健康的动、植物的不与外部接触的组织内部,强酸强碱,化学元素灭菌剂等表面和内部都是无菌的.从以上可以看出：在地球表面无菌世界要比有菌世界小的多.灭菌是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,即把所有生命的物质全部杀死.与此相关的一个概念是消毒,它指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用,显然经过消毒,许多细菌芽孢、霉菌厚垣孢子等不会完全杀死,即由于在消毒后的环境里和物品上还有活着的微生物,所以通过严格灭菌的操作空间（接种、超净台等）和使用的器皿,以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物.在这样的条件下进行的操作,就叫做无菌操作.植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的,甚至超过微生物的培养要求,这是因为培养基含有丰富的营养,稍不小心就引起杂菌污染.要达到彻底灭菌的目的,必须根据不同的对象采取不同的切实有效的方法灭菌,才能保证培养时不受杂菌的影响,使试管苗能正常生长.常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类,即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理.这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用.1、培养基用湿热灭菌培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序.高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加.在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃.在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢.注意完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才能彻底.高压灭菌放气有几种不同的做法,但目的都是要排净空气,使锅内均匀升温,保证灭菌彻底.常用方法是：关闭放气阀,通电后,待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀.关阀再通电后,压力表上升达到0.1MPa时,开始计时,维持压力0.1-0.15MPa,20分钟.按容器大小不同,保压时间有所不同,见表.该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字,如果容器体积较大,但是放置的数量很少,也可以减少时间. 　　三、接种 　　接种时由于有一个敞口的过程,所以是极易引起污染的时期,这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身引起,接种室要严格进行空间消毒.接种室内保持定期用1%-3%的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行搽洗.除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外,还可在使用期间用70%的酒精或3%的来苏儿喷雾,使空气中灰尘颗粒沉降下来.无菌操作可按以下步骤进行：（1）在接种4小时前用甲醛熏蒸接种室,并打开其内紫外线灯进行杀菌；（2）在接种前20分钟,打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯；（3）接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等；（4）上工作台后,用酒精棉球搽拭双手,特别是指甲处.然后搽拭工作台面；（5）先用酒精棉球搽拭接种工具,再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍,然后反复过火尖端处,对培养皿要过火烤干；（6）接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽等；（7）接种完毕后要清理干净工作台,可用紫外线灯灭菌30分钟,若连续接种,每5天要大强度灭菌一次.接种是将已消毒好的根、茎、叶等离体器官,经切割或剪裁成小段或小块,放入培养基的