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科学家将绿色荧光蛋白(GFP)基因转入小鼠胚胎干细胞(ES)内,GFP基因表达就会使细胞带有绿色荧光的,继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究,流程如图.请回
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问题描述:

科学家将绿色荧光蛋白(GFP)基因转入小鼠胚胎干细胞(ES)内,GFP基因表达就会使细胞带有绿色荧光的,继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究,流程如图.请回答:

(1)在步骤①中,若绿色荧光蛋白(GFP)基因是cDNA片段,则在GFP基因的上游必须加入___,该核苷酸序列是___酶识别和结合的部位.

(2)步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞,ES细胞一般从囊胚的___分离得到.在培养ES细胞时,细胞充满培养皿底部后停止分裂,这种现象称为___.

(3)为获取更多卵母细胞,首先要对供体母鼠注射促性腺激素,使其___,然后可用人工方法从小鼠输卵管内获得,该过程称为___.

(4)图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有___,再通过___技术移入代孕母鼠子宫内继续发育.

刘明伟回答:
  (1)在步骤①中,若绿色荧光蛋白(GFP)基因是cDNA片段,cDNA片段中没有启动子,而基因表达载体的组成中必需要有启动子,故在GFP基因的上游必须加入启动子,该核苷酸序列是RNA聚合酶识别和结合的部位.   (2)步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞,ES细胞一般从囊胚的内细胞团分离得到.在培养ES细胞时,细胞充满培养皿底部后停止分裂,这种现象称为接触抑制.   (3)为获取更多卵母细胞,首先要对供体母鼠注射促性腺激素,使其超数排卵,然后可用人工方法从小鼠输卵管内获得,该过程称为冲卵.   (4)图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有绿色荧光细胞,再通过胚胎移植技术移入代孕母鼠子宫内继续发育.   故答案为:   (1)启动子      RNA聚合   (2)内细胞团     接触抑制   (3)超数排卵      冲卵   (4)绿色荧光细胞         胚胎移植
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