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【PCR扩增时,引物与模板配对到什么程度...>
【PCR扩增时,引物与模板配对到什么程度就可以扩出目标片断?不考虑其他因素.请给详细专业的回答我的意思,是不是引物比如说25bp,要与模板完全配对才可以扩增,还是可以有一个或几个不匹配】
1人问答
问题描述：

PCR扩增时,引物与模板配对到什么程度就可以扩出目标片断?不考虑其他因素.请给详细专业的回答

我的意思,是不是引物比如说25bp,要与模板完全配对才可以扩增,还是可以有一个或几个不匹配的也可以扩得到(不要考虑温度和试剂等方面,只单纯从引物与模板相配方面讲).另外,如果差一点也可以扩增出来,那差别多少后就扩不出来了?

孟庆华回答：
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　　这取决与你使用的退火温度,引物浓度,离子强度,引物序列等诸多问题 　　3‘端5个碱基影响扩增效率,当这5个中特别是后3个中有错配特别影响引物扩增的效率,但并不是不能引发,比如ssp引物配合taq酶,当退火温度降低时,即使3’端碱基不互补也能发生扩增.简单的说一个碱基错配会降低引物tm3－5度,当tm严重低于退火温度时便不能引发扩增,所以差多少能扩出来取决于错配碱基的位置,引物长度和tm,退火温度.5’端的修饰,如引入突变或加入酶切位点,这些序列是不计算在引物tm中的,不需要考虑,只要在3‘端有能提供足够tm的序列即可.
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－10114下一位是几 【56*98/56=?存车处】 5xy^与5x^y是同类项吗?为什么(^为平方） 小数除以整数,如果除到被除数的末尾还有余数,要在后面添0继续除. 测试题,关于数字排序的问题测试题：有一篮橘子共52个,小明和小聪两人轮流从蓝中拿橘子,至少拿1个,最多拿2人.谁拿到最后一个橘子,谁就是失败者,另一个人就获胜.(1)想一想：如果让小明先 在VB中,表达式(18+253)Mod5的值是多少?请再写一下该式的含义是什么. 16*21+19*21+35*19用简便方法计算 【如图，将一个高尔夫球从O点击出，它的飞行路线是抛物线y＝−12x2+3x，（1）求高尔夫球所能达到的最高点的坐标．（2）如果球的落点比击球点高1m，求球飞行的水平距离．】 运用加减乘除四种运算,如何由4,5,8,3,这四个数得到24?考卷上的,刚上初一,不会做…… 一个圆柱体【中间是空的】圆底面的直径是4厘米,高5厘米,里面是小圆的直径是2厘米,与水接触的面积是多少 悬赏！！谁有18版红果园口算大卡：2年级下册（B北师版）的答案？ 【一个平行四边形的面积是48平方米,两组对边之间的距离分别是6厘米和8厘米,这个平行四边形的边长分别是多少厘米】 【设Q是有理数集,集合X={X|a+b根号2,a,b属于Q,x≠0|,集合A={1/x|x∈X}集合B={2x|x∈X},集合C={x/根号2|x∈X}集合D={x的平方|x∈X},和X相同的集合有?我想知道哪个不是的附：集合A={1/x|x∈X}={x|x=1/(a+b√2)}={x|x=】 【为什么一张平整的纸对折以后,折痕是直线?这其中的原理是什么?】 【飞机每小时飞行800千米，可以说飞机的飞行速度是______．】 【商场举办促销活动,原价1200元的风衣,现在比原价便宜1/10.三天后,又按现在价格的9/10促销,这是买比原价节省多少元,相当于原价的几分之几?】 筑路队修一条路,第一天修了全长的20分之1,第二天比第一天多修了0.5千米,两天共修了4千米,这条路全长多急 3,负4,6负13算24（可以是-24）可以是-24,也可以是24,..至少写两个 苹果比梨多四分之一,梨比苹果少45千克.有苹果多少千克? 【4个4随便用加减乘除几个运算符号怎样能够等于10?】 【设函数f(x)=cos(2x-π/3)+cos2x-1,若x€[0,π/2],求f(x)的最大值及相应的x值】 【李红读一本故事书第一天读全书的四分之一第二天比第一天多读八分之一第二天读了全书的几分之几】 1.ABC中,∠A=120°,AB=BC=8cm,那么△ABC的周长为_______,面积为_____.（没图,自己画个.）2.在Rt△ABC中,∠C＝90°,∠A＝30°,斜边上的中线CD＝10cm,则BC_____cm,AC＝______cm,△ABC的面积＝_______cm^2 【已知y＝f(x)的定义域为[-6,6]且为奇函数,当x∈[0,3]时是一次函数,当x∈[3,6]时是二次函数,f(6)＝2,且f(x)≦f(5)＝3,求函数f(x)的解析式.【为什么在原点,而不是在0,10,2或者0,-1什么的】】 【一个长为10cm,宽为6cm的长方形纸中,剪下一个面积最大的半圆,剩下部分的面积占长方形面积的百分之几?（百分号前保留两位小数）】 【小宇看一本故事书,第一天看了全书的1/6,第二天看了52页1这时看过的与未看过的页数比是3：2,这本书共有多少页?】 小敏用一根长为8cm的细铁丝围成矩形，则矩形的最大面积是（）A.4cm2B.8cm2C.16cm2D.32cm2 设Q是有理数集,集合X={X|a+b根号2,a,b属于Q,x≠0|,集合A={1/x|x∈X}集合B={2x|x∈X},集合C={x/根号2|x∈X}集合D={x的平方|x∈X},和X相同的集合有? 二年级口算那里有? 李老师每分钟打120个字,一篇稿件有3450个字,他30分钟能打完吗?1.甲,乙两地相距500千米,两辆汽车同时从甲乙两地相向开出,客车每小时行85千米,货车每小时行49千米,3小时能相遇吗?2.五年级一班 笑笑的妈妈开一了家鞋店，笑笑把过去一年售出的凉鞋数量做了一个统计，结果如下：去年凉鞋销售量统计表月份123456789101112数量30206070140230350320180803010你能帮小东完成统计图，表示出去年 直径8厘米,宽10厘米,求圆柱的底面积? 1.已知AB=10厘米,BC=15厘米,现有一把8厘米的刻度尺,利用刻度尺测∠B是否等于90度. 【求直线2x-3y+1=0与圆x平方+y平方=1的交点】 （x+2）^3—x（3x+1）^2+（2x+1）（4x^2-2x+1）=42“^”就代表次方^2表示平方^3表示3次方 Howeveronlyrates&unitsfortilingwillbequoted.谢绝一切在线翻译工具 用一张长25.12厘米,宽18.84厘米的长方形硬纸板,卷成一个圆柱形,圆柱的高是多少,底面周长是多少?用一张长25.12厘米,宽18.84厘米的长方形硬纸板,卷成一个圆柱形,圆柱的高是多少?底面周长是多 一百分之一+一百分之二+一百分之三+.+一百分之十一=几分之几 136分之38最简分数 一种冰箱的原价3000元,先降价5分之1,再提价5分之1,现价为（）? 怎么解有3个未知数3个等式的函数 208年全国废水（含工业废水和城镇生活污水）排放总量约为572忆吨,排放达标率约为72%,其中工业废水排放达标率约为92%,城镇生活污水排放达标率约为57%.这一年全国工业废水与城镇生活污水的 正十七分之三加负三点三六加正七点三六加十七分之十四的简便运算 给你四个数：5·负3·2·6,并对他们进行加减乘除混合运算,能使结果为24吗急！！！！！ 谁有二年级-数学-上册-口算题卡-人教版的答案？ 解方程90%x*（1-20%)=120 205°45′04〃÷4=205°45′04〃÷4=51°+26′+（）秒? 苹果和梨一共15个,问梨最少几个?最多几个?我不懂怎么解答可是我女儿答得是：梨最少有2个，做多有10个，老师竟然打了勾，说是对的，真不知道是怎么算出来的。 【16+56+98=】 谁有2018-小学口算大通关-数学-二年级上-人教版的答案？
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【科学研究发现，人脑中有一种叫做镜像神经元的细胞使我们的祖先逐步脱离猿类。它使人们学会从简单模仿到更复杂的模仿，这就解释了为什么人们看到其他人打哈欠时，自己也会被感染，】 科学探究的步骤 关于社会意识和社会存在的选择题,求教社会意识是对社会存在的反应,主要是对（）.A.物质资料生产方式的反应.B.社会发展规律的反应.C.统治阶级意志的反应.D.科学文化的反应.请问应该选择 科学电和磁.嗯,那问题是这样子的：假如说你用发电机去把电提供给家用电器（是用并联的）,那如果有更多的家用电器要用,你打算在发电机上做些什么变化. 无论是在（）,()还是在（）中,我们的身体时刻都在发生变化.（六年级下苏教版科学） 科学研究最重要的环节是什么,科学的核心是什么? 【2012年达到4%,如果2012年我国国内生产总值为325000亿元,那么2012年国家财政教育经济支出应为多少元?（结果用科学计数法表示）】 【六年级上册科学复习题1.世界是由组成的,不断变化的构成了如此丰富多彩、绚烂美丽的世界.2.物质的变化分两种：一类仅是（）的变化；（也叫物理变化）；另一种是变化会产生（）.（】 我记得科学家说过我们的宇宙很久以后可能有四种结果,一个是膨胀至撕裂,一个是收缩,还有两个是什么? 科学家们已经发现宇宙有多大了吗? 魏晋南北朝时期与秦汉时期相比,自然科学进步最突出的表现是在A.B.天文和医学C.农学和医学D. 法国、美国、荷兰的三位科学家因研宄“分子机器的设计与合成”获得2016年诺贝尔化学奖．轮烷是一种分子机器的“轮子”，轮烷的一种合成原料由C、H、O三种元素组成，其球棍模型如图所 科学研究最重要的环节是.同时要求我们做实验前必须明确什么 科学家们在南极进行了哪些方面的科学考察? 科学化学式的书写一氧化氮中氮显+2价,用适当的数字和符号填空 归纳和演绎是重要的科学方法．下列归纳或演绎合理的是（）A.有机物是一类含碳化合物，所以CH4、CO2都是有机物B.硫酸、盐酸电离时都能产生H+，所以电离能产生H+的化合物是酸C.金 溴水在科学实验中具有重要的作用，如可用于物质的鉴别和分离提纯，将11.2L标准状况下的甲烷和乙烯的混合气体通入足量的溴的四氯化碳溶液中充分反应，溴的四氯化碳溶液增加了5.6g，求 科学研究的步骤是什么? 阅读材料回答问题对内坚持科学发展，对外坚持和平发展，是中国政府和中国人民的郑重选择和庄严承诺，中国将坚定不移地走和平发展道路。请从我国国家根本利益和时代 尽管探究活动有着不同的_____,但是,科学家研究的基本过程是____的 读下面自然科学文段，完成后面题目。纳米技术科学家为我们勾勒了若干年后的蓝图：纳米电子学将使量子元件代替微电子器件，巨型计算机能装入口袋里；通过纳米化，易碎的陶瓷可 【既然说宇宙无限大,那么科学家怎么知道它在膨胀呢?只是通过实验来证明的吗?】 【教学研究：心理学是不是科学?当然是!那社会科学呢?那精神科学呢?那心灵科学呢?为什么我们总是将科学窄化为自然科学而排出一切精神方面的、心灵方面的、意念方面、、、、、等等的研】 【初中科学（电和磁）指南针指的是地理的南极还是地磁的南极?地理的南极和地磁的南极的概念分别是什么?应该如何区分呢?】 【用科学记数法表示－2010,应记作_________,有___个有效数字.把393.95精确到0.1得_________,有效数字有_______个.已知|X＋3|＋（y－2）=0,则x－y=__________.若a＋b】 牛顿是哪个国家的科学家? 科学知识中有许多的”一定“和”不一定“．下列关于酸和碱的叙述中．正确的是（）A.酸不一定是化合物，碱一定是化合物B.酸中一定含有氢、氧元素，碱中也一定含有氢、氧元素C. “扩大几倍”和“扩大到它的几倍”是否有区别?听说有区别,按我的理解：如,“2”扩大4倍应是“2×（4+1）=10”；扩大到它的4倍应是“2×4=8”.我是浙江的小学生,以前用的浙教版不太科学,都 研究发现，“太阳出来喜洋洋”有充足的科学依据。当阳光照射皮肤时，人体产生的维生素D3会使大脑分泌一种名叫血清素的激素，从而让人愉悦放松。这进一步佐 科学家是怎么推测宇宙的大概年龄 把科学探究的基本过程进行排序1.建立猜测和假设2.获取事实与证据3.4.合作交流5.制订计划6.检验与评价正确的步骤是： 1958年6月12月，钱学森在《中国青年报》发表科普文章指出，“土地所能供给人们的粮食产量碰顶了吗？科学的计算告诉人们：还远的很！……因为，农业生产的最终极限决定于每年单位面积 2013年10月7日，诺贝尔生理学或医学奖揭晓，该奖授予了发现细胞囊泡运输调控机制的三位科学家．囊泡膜属于生物膜的一种，下列关于生物膜的相关叙述，正确的是（）A.细胞内各种生 【下列说法正确的是（）A.宏观上的物质对外不显电性，是因为组成它们的微观粒子都是电中性的原子和分子B.某物质经科学测定只含有一种元素，则可以断定该物质是一种纯净物C.利】 阅读下列材料；根据《自然科学大事年表》的统计，从公元前6世纪至公元1000年，中国在世界重大科技成就中所占的比例约计50%－71%。公元1000年后的宋元时期的几项重大发明对促进世界文明 义务教育课程标准实验教科书科学六年级上册铁生锈 科学.(2218:44:31)姚明的蜡像体积约为0.1米3,每只脚与水平地面接触面积为2.5×10的-2米2,石蜡密度为0.9×10的三次方千克/米31.蜡像的质量2.站立的蜡像对水平地面的压强P 科学家怎样证明宇宙在膨胀? 1996年科学家在宇宙深处发现了……1996年科学家在宇宙深处发现了H3.请回答：1个H3中有____个质子、____个电子.2)构成H3的原子的结构示意图是____（填序号）答案我知道,尤其第一问, 科学家在太空进行了哪些实验 【化学是一门以实验为基础的自然科学，化学实验在化学学习中具有极其重要的作用．下列实验中所选用的仪器合理的是①用50mL量筒取5.2mL稀硫酸；②用分液漏斗分离苯和四氯化碳的混合物】 在英文中,通常用centillion表示最大的数.就是在1后再加600个0,如果把这个数用科学记数法,应表示为()? 研究发现，“太阳出来喜洋洋”有充足的科学依据。当阳光照射皮肤时，人体产生的维生素D3会使大脑分泌一种名叫血清素的激素，从而让人愉悦放松。这进一步佐证了（）①思维和存 科学探究的基本过程中哪步最重要? 下列对于自然科学的探索及发现历程说法不正确的是（）A.1857年，法国微生物学家巴斯德通过显微镜观察，提出酿酒中的发酵是由于酵母细胞的存在，没有活细胞的参与，糖类不可能变 【在我国，对待宗教的正确态度有[]①坚持科学的态度②应支持和鼓励信教③遵循辩证唯物主义和历史唯物主义④大力宣传无神论，消灭宗教A、①②B、②③C、①③D、②④】 这是我没想到的提示：这”，指社会生活。生活有多广阔，“这”就有多丰富。比如家庭生活、学校生活、社会上的人和事、自然现象、科学探索等方面，都会在平凡的故事或者现象中蕴 为什么科学家在2月去南极 现在的科学家得出的结论是宇宙在不断的膨胀,那么宇宙以外是什么呢 科学植物体中物质的运输实验题在线等某人做了个实验：选取两枝有较多不定根和叶的枝条,用剪刀对其中一支进行环割处理,把它们的根分别浸在土壤浸出液中,注意土壤浸出液的液面不
请把时间花在___上以这个题目为题写一篇作文500字 答谢中书书怎样改写成作文?要写成抒情写景的散文! 【雪景作文400（抓住一处景物写,如：马路旁、小区里、花园里、大山里等）450字左右,像“伯公下”那位写的就不行!】 武松是不是英雄?（400字作文）四年级下习作6的作文.十万火急! 文明在我身边作文开头怎么写 作文我为扒手而烦恼 【描写雪景,但其中又无一个雪字的作文】 【描写济州岛风景优美的句子要写作文...】 我也是一道风景线作文 作文中酸甜苦辣中每个一字应该用增样的例子来形容? 四年级第一单元作文（要写一处景物,不要是校园,400字左右,是在建德市内） 以诗句开头描写春天的作文要求：至少用两句古诗,多用成语,字数在400字左右,不要抄的! 半命题作文我不再——————400字左右,最好要有6年级水平. 作文了【暑假里的新鲜事】800 【以“日积月累”为论点的议论文,六年百字左右,最好引用一些名言作道理论据,是北京市高考作文】 【作文那段幸福的时光】 【作文:你是一道亮丽的风景】 写井冈山的好词、好句.明天写作文要!紧急! 四年级蚂蚁搬家作文四百字左右 七彩青春作文 苏州雪景作文 【我喜欢童年作文】 小学作文关于母爱300字左右求高速回答 【从此,我不再_____半命题作文（要点评）】 寻找身边的长妈妈,作文 作文我终于尝到了甜头 【百折不挠精神鼓励着我650字作文】 文明是一道美丽的风景作文 童年作文的开头!帮我的《童年》作文想个开头,用一段排比和比喻句,大概在200字左右,好的话还有悬赏积分! 四年级下册第四单元作文怎么写一张旧照片,400字左右,看照片写 写景作文加批注 作文：日积月累—读书 【关于美食的作文题目?要有创意的,不能太俗···】 握手作文 6年级暑假作文 谁有好词好句多的写景作文! 【关于鸟外形,特征,样子的作文（作文网）我超急!明天要交!】 阅读下面的材料，根据要求作文。被誉为“最美乡镇干部”的某乡党委书记，在一个其他人不肯去、去了也待不到两年的地方，一干就是八年，以坚定的信念和顽强的意志，率领村民发 成功=不放弃作文,或是等待不等于成功,放弃就一定失败…… 运用联想手法的写景作文 【新版小蝌蚪找妈妈作文】 求一篇作文——《我们一起走过》《我们一起走过》作文要新不要很有名大家都看过的我是初中生600字 写景作文写景的文章,注意选取独特的视角,放飞想象的翅膀.记事的文章,注意有顺序地把事情的经过记叙详细,表达自己的真情实感.记叙清楚,语句通顺,感情真切. 【暑假里的新鲜事作文a新鲜事作文】 仿写四年级上册第二课《桂林山水》,写一篇写景作文,400字以上急,明天就得交了. 【写作文关于雷锋的故事!】 一只蜘蛛引发的故事作文 一篇我喜欢吃荔枝的作文写出喜欢吃的原因,尤其要写出自己的感受. 【描写北国雪景的作文结尾】 【描写冬天的雪景作文】
泡笋的做法 蜡烛 锄大地技巧 肾结石会引起后背疼痛吗 玉米淀粉可以用什么代替 普洱茶便秘减肥食谱 杭州西子湖有观澜亭吗 研究生期間怎麼碩博連讀（研究生又迎來好消息） 周杰伦的mojito是什么风格 Andrea Bocelli - Beautiful that way (La vita e bella) 最有效果的瘦腰方法：挺立 米醋清洗洗衣机的方法 汽车安全带是谁发明的 2023年5月23日请佛好吗 2023年5月23日是请佛吉日吗 保养维修服务合同 配制酒有哪些 歌平调四时词 其二 正方形对角线怎么计算 篱落疏疏一径深树头新绿未成荫的景物特点是什么
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下列对作者、课文内容表述有误的一项是（2分）（）A．普希金，俄国诗人，俄罗斯近代文学的奠基者。B．《我的叔叔于勒》中的克拉丽丝，《范进中举》中的胡屠户，都和契
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仲殊的《柳梢青.岸草平沙》一词的上片描写了江南吴中什么样的景色
珍惜愤怒毕淑敏1,选文的中心论点?2,请分析文中划线句子的论证方法及作用（没有愤怒的生活是一种悲哀.犹如跳跃的麋鹿丧失了迅速奔跑的能力,犹如敏捷的灵猫被剪掉胡须.当人对一切都无
【22．微写作（10分）从以下三个题目中任选一题，按要求作答。不超过150字。①3月3日是世界爱耳日，6月6日是世界爱眼日。请为“世界爱耳日”】
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求描写雨天湖景和浪花汹涌澎湃的诗词佳句.
雨晴【唐】王驾雨前初见花间蕊，雨后全无叶底花。蜂蝶纷纷过墙去，却疑春色在邻家。1.这首小诗的一二句描写了哪两种景致？2这首小诗的最后一句可谓
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【阅读下面的文言文世之论书者多自谓书不必有法，各自成一家。此语得其一偏。譬如西施、毛嫱，容貌虽不同，而皆为丽人；然手须是手，足须是足，此不可移者。作字亦然，虽形气不同】
下列选项错误的一项是（）Ａ.《左传》我国第一部叙事详细的编年体史书。原名《左氏春秋》，又称《春秋左氏传》，相传为春秋末年鲁国史官左丘明所著。记事起于鲁隐公元
【关于心愿的名言】
得道多助失道寡助中心论点提出后作者是怎样进行论证的?
王之涣和畅当的鹳雀楼运用相同表现手法的句子是还有王诗的特点是什么呢两首诗表现了鹳雀楼的什么气势和登上鹳雀楼后远望的什么胸襟麻烦再说说“天势围平野,河流入断山'两句诗的含
对于不求甚解的读书态度作者持什么态度是用什么事例来论证的
蝴蝶泉选自,其中写泉水清洌可鉴,可鉴的意思是?
下列关于文学常识的说法，有错误的一项是（）A.《纪念伏尔泰逝世一百周年的演说》是一篇充满激情的演讲稿，作者是雨果；《福楼拜家的星期天》写了都德、屠格涅夫等四位作家，
形容做事前担心才能做好工作的成语,三段,每段四个字二段的成语，每段四个字。形容做事前恐怕做不好，而担心，有了这样的心态才能认真做事，反而能做好事。
五年级下册的生字表2有什么?（我忘带语文书回家了）快要现在这本书的（科教版）12课到14课的生字生字表2的急
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