1、如果糖样中没有别的带醛基的有机物,可以用DNS法测还原糖.
2、如果糖样中有别的带醛基的有机物,可以考虑采用高效液相色谱法(HPLC).
3、其它也有一些方法,比如碘量法等.
葡萄糖含量测定的方法化学分析法:仪器分析法:原理:优点:缺点:适用范围:
碘量法实验原理:碘与NaOH作用可生成次碘酸钠(NaIO),葡萄糖(C6H12O6)能定量地被次碘酸钠(NaIO)氧化成葡萄糖酸(C6H12O7)。在酸性条件下,未与葡萄糖作用的次碘酸钠可转变成碘(I2)析出,因此只要用Na2S2O3标准溶液滴定析出的I2,便可计算出C6H12O6的含量。其反应如下:⒈I2与NaOH作用:I2+2NaOH==NaIO+NaI+H2O⒉C6H12O6和NaIO定量作用:C6H12O6+NaIO==C6H12O7+NaI⒊总反应式:I2+C6H12O6+2NaOH==C6H12O7+NaI+H2O⒋C6H12O6作用完后,剩下未作用的NaIO在碱性条件下发生歧化反应:3NaIO==NaIO3+2NaI⒌在酸性条件下:NaIO3+5NaI+6HCl==3I2+6NaCl+3H2O⒍析出过量的I2可用标准Na2S2O3溶液滴定:I2+2Na2S2O3==Na2S4O6+2NaI由以上反应可以看出一分子葡萄糖与一分子NaIO作用,而一分子I2产生一分子NaIO,也就是一分子葡萄糖与一分子I2相当。本法可作为葡萄糖注射液葡萄糖含量测定。步骤:1.配制250ml0.1mol/LNa2S2O3溶液。称取一定量的Na2S2O3·5H2O,溶解于适量新煮沸且刚冷却的水中,加入约0.05gNa2CO3,配成250ml溶液,放于棕色瓶中。放置1-2周后再进行标定,暗处保存;2.配制150ml0.05mol/LI2溶液。称取2g预先已研磨好的I2置于小烧杯中,加入4gKI和几毫升水,搅拌使I2全部溶解,稀释后配成150ml溶液,放于棕色瓶中,置暗处放置;3.标定Na2S2O3溶液。移取25.00mlK2Cr2O7于锥形瓶中,加入10ml10﹪KI溶液和5ml6mol/LHCl(勿三份同时加入),用表面皿盖上瓶口,于暗处放置5min,取出后,加入水50-100ml,立即用待标定的Na2S2O3溶液滴定至试液呈黄绿色时,加入2ml淀粉溶液,继续用Na2S2O3溶液滴定至兰色恰好褪去为终点;4.I2溶液的标定。移取25.00mLI2溶液于250mL锥形瓶中,加100mL蒸馏水稀释,用已标定好的Na2S2O3标准溶液滴定至草黄色,加入2mL淀粉溶液,继续滴定至蓝色刚好消失,即为终点。计算出I2溶液的浓度;5.葡萄糖含量测定。取5%葡萄糖注射液准确稀释100倍,摇匀后移取25.00mL于锥形瓶中,准确加入I2标准溶液25.00mL,慢慢滴加0.2mol/LNaOH,边加边摇,直至溶液呈淡黄色。加碱的速度不能过快,否则生成的NaIO来不及氧化C6H12O6,使测定结果偏低。将锥形瓶盖好小表皿放置10~15分钟,加2mol/LHCl6mL使成酸性,立即用Na2S2O3溶液滴定,至溶液呈浅黄色时,加入淀粉指示剂3mL,继续滴至蓝色消失,即为终点。记下滴定读数。