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真菌分离培养步骤具体是怎样的?包括消毒无菌水洗晾干什么的……
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问题描述:

真菌分离培养步骤具体是怎样的?包括消毒无菌水洗晾干什么的……

陈许玲回答:
  .1.1实验的准备沙堡琼脂培养基的制备:用天平称取蛋白胨10克、麦芽糖40克、琼脂20克,用量筒量取蒸馏水1000毫升置烧杯中混匀,在电炉上加热熔化,加热过程中不断用玻璃棒搅拌,调整PH值至5.4,倒入锥形瓶中,115℃灭菌20...
索寒生回答:
  消毒?无菌水洗?晾干?
陈许玲回答:
  稀释分离法(1)取灭菌培养皿三个,平放在湿纱布上,编号(2)用灭菌吸管吸取灭菌水,在每一皿中分别注入0.5~1.0ml。(3)用移植环蘸一滴孢子悬浮液,与第一个培养皿中的灭菌水混合,再从第一个培养皿移三环到第二个培养皿中,混合后再移三环到第三个培养皿中。(4)将熔化开冷却到45~50C的培养基,分别倒在三个培养皿中(为防止细菌污染,也可以向每个培养皿中事先加入1-2滴25%乳酸),摇匀,凝固,要使培养基与稀释的菌液充分混匀。提示:倒平板时的培养基温度一定要掌握好,过热易将病原菌烫死而使分离失败,过冷则倒入培养皿中后难以形成平板,而成为起伏不平的表面,不利于分离。为大体估计培养基温度,可将盛培养基的器皿靠在人手背上,如果手背感到烫但尚可以忍耐,则大体为45~50C。(5)将培养皿翻转后置恒温箱(2513)中培养,数日后观察菌落生长情况。挑菌。将培养后长出较为整齐一致的单个菌落分别挑取,接种到斜面培养基上,置25℃左右培养。待菌长出后,检查菌是否单纯,若有其他菌混杂,就要再一次进行分离纯化,直到获得纯株培养应该有所帮助吧!
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