EPSPS是叶绿体中的一种酶,它能催化芳香族氨基酸的合成;草甘膦是一种除草剂,它能竞争性抑制EPSPS的作用而使植物死亡.因此草甘膦的使用也会影响到农作物的正常生长.目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入农作物植物细胞内,从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦.
(1)普通大豆施用草甘膦之后,电镜下可以看到叶绿体很快变形,其原因是氨基酸合成受阻直接影响了___的合成,使叶绿体内的其结构和功能严重受损从而使植物死亡.
(2)研究人员以大豆“黑农37”胚尖为外植体,利用农杆菌介导法将EPSPS基因成功转入大豆,大豆产生了更多的EPSPS来抵抗草甘膦,成为抗除草剂(草甘膦)大豆.
①下表分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点.假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列
分别为
酶切位点 |
(3)要测定EPSPS基因最终是否整合到大豆的某一染色体上,可用___方法,或直接测定该染色体的___
(4)图3是目的基因EPSPS(4.0kb,1kb=1000对碱基)与pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图.图中Ap′是抗氨苄青霉素基因,lacZ是显色基因,其上的EcoRⅠ识别位点位于目的基因插入位点的右侧.现用EcoRⅠ酶切质粒,酶切后进行电泳观察,若出现长度为___kb和___kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功.(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计).