实验一
ApaLI(178)
P(BLA)ALPHA
质粒DNA的提取、质粒DNA的提取、酶切DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳
ApaLI(2367)
EcoRI(397)AvaI(413)XmaI(413)SmaI(415)
APr
pUC19
BamHI(418)PstI(440)HindIII(448)
P(LAC)ORI
2686bp
ApaLI(1121)
一实验目的
掌握碱裂解法分离质粒DNA的基本原理和操作要点.的基本原理和操作要点.掌握碱裂解法分离质粒的基本原理和操作要点了解限制性内切酶作用的原理、特点和酶切质粒了解限制性内切酶作用的原理、特点和酶切质粒DNA的试验方法的试验方法学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术的方法和技术学习琼脂糖凝胶电泳检测
二实验原理
质粒是一种染色体外能够稳定遗传的因子,质粒是一种染色体外能够稳定遗传的因子,具有双链共价闭环结构的DNA分子.是染色体外小型(200kb)的共价、闭合、环状的双链DNA分DNA分子.是染色体外小型(1-200kb)的共价、闭合、环状的双链DNA分分子DNAcccDNA),能自主复制并能稳定遗传的遗传因子.),能自主复制并能稳定遗传的遗传因子子(cccDNA),能自主复制并能稳定遗传的遗传因子.
培养细菌使质粒扩增三个基本步骤收集和裂解细菌分离和纯化质粒DNA分离和纯化质粒DNA