(2014•上海)回答下列有关遗传信息传递与表达的问题.
pIJ702是一种常用质粒(如图),其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列.
(1)质粒DNA分子中的两条链靠______键维系成双链结构.
(2)以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置换pIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的SacⅠ/SphⅠ片段,构成重组质粒pZHZ8.上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中.由此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点,并说明判断依据______.
(3)已知pIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ区域长度为2.5kb,若用ClaⅠ和PstⅠ联合酶切pZHZ8,则参照表1数据可断定酶切产物中最小片段的长度为______kb.
表1pIJ702 | pZHZ8 | |
BglⅡ | 5.7kb | 6.7kb |
ClaⅠ | 5.7kb | 2.2kb,4.5kb |
PstⅠ | 5.7kb | 1.6kb,5.1kb |
表2
“+”表示生长;“-”表示不长固体培养基中硫链丝菌素浓度(μg/mL) | 0 | 1 | 2 | 5 | 10 |
不含质粒的链霉菌生长状况 | +++++ | +++ | + | - | - |