【如图1为某种常用质粒的序列图，LacZ基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，Amp为氨苄青霉素抗性基因．图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列．请回答下列问题：（1）若要筛选成】|初中生物问答-字典翻译问答网

【如图1为某种常用质粒的序列图，LacZ基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，Amp为氨苄青霉素抗性基因．图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列．请回答下列问题：（1）若要筛选成】

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问题描述：

如图1为某种常用质粒的序列图，Lac Z基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，Amp为氨苄青霉素抗性基因．图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列．请回答下列问题：

（1）若要筛选成功导入目的基因的重组质粒，培养基中应加入的物质有___和___，构建重组质粒时需要的工具酶有___，对获取的目的基因可用___技术对其扩增．

（2）实验小组用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割目的基因和质粒，构建重组质粒后导入大肠杆菌中，在筛选重组质粒的培养基上，若大肠杆菌菌落显蓝色，说明导入了___．若大肠杆菌菌落显白色，说明导入了___，没有导入任何外源DNA的大肠杆菌___（填“能”或“不能”）在该培养基上生存．

（3）将若干个质粒和目的基因用BamHⅠ和BlgⅡ两种限制酶切割后，用DNA连接酶相连，然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功连接后的产物，获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段，则目的基因的长度为___kb（已知目的基因的长度大于1kb，1kb=1000个碱基对）．

韩益锋回答：

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　　（1）由于Lac Z基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，Amp为氨苄青霉素抗性基因，所以若要筛选成功导入目的基因的重组质粒，培养基中应加入的物质有X-gal和氨苄青霉素．构建重组质粒时需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶，对获取的目的基因可用PCR技术对其扩增．　　（2）构建重组质粒后导入大肠杆菌中，在筛选重组质粒的培养基上，由于Lac Z基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，若大肠杆菌菌落显蓝色，说明导入的是不含目的基因的空白质粒．若大肠杆菌菌落显白色，说明Lac Z基因被破坏，不能编码相应的酶，所以导入的是重组质粒．没有导入任何外源DNA的大肠杆菌不含氨苄青霉素抗性基因，所以不能在该培养基上生存．　　（3）根据BamHⅠ和BlgⅡ两种酶识别的序列为G↓GATCC、A↓GATCT．质粒上存在BamHI的切割位点，假设用a和b表示．目的基因上存在BamHⅠ和BlgⅡ两种酶的酶切位点，假设分别用c和d表示．那么目的基因与质粒链接的方式可能有两种，如图所示：　　用BamHⅠ切割和EcoRⅠ切割成功连接后的产物，获得了长度为0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四种长度的DNA片段．　　①如果BamHⅠ切割ac处，可能的情况如图：　　②如果BamHⅠ切割ac处，可能的情况如图，　　据图比较可推断出目的基因的长度为1.8Kb．　　故答案为：　　（1）X-gal 氨苄青霉素限制酶、DNA连接酶 PCR 　　（2）不含目的基因的空白质粒重组质粒不能　　（3）1.8