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【大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳】
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问题描述:

大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落.pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因.如图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图.据图回答下列问题:

(1)作为受体大肠杆菌应______,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌.取用氯化钙溶液处理(目的是)______过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入______.

(2)图中的培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入______等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌.

(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:①______.②______.

雷海浜回答:
  (1)PUC118质粒携带了氨苄青霉素抗性基因,受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因,才能才能在含有氨苄青霉素的培养基上筛选出导入重组质粒的受体大肠杆菌.用氯化钙溶液处理增加其细胞壁的通透性过的受体大肠杆菌...
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