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琼脂糖跑DNA时无条带但另一方法证实有DNA,为什么?二甲苯青蓝会不会影响EB观察?电泳槽是垂直型.电泳槽是丙烯酰胺的电泳槽电压100VDNA浓度1ng/ul,上样20ul,分子量大于6000bp
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问题描述:

琼脂糖跑DNA时无条带但另一方法证实有DNA,为什么?二甲苯青蓝会不会影响EB观察?电泳槽是垂直型.

电泳槽是丙烯酰胺的电泳槽电压100V

DNA浓度1ng/ul,上样20ul,分子量大于6000bp

邓金权回答:
  二甲苯青一般不会,1要确认你有没有跑出去2DNA的量低于琼脂糖胶-EB的检出限,这样你用PAGE-银染可能有而EB没有
李浩川回答:
  谢谢我是1ng/ul,但是我的上样量20ul,为什么也没有呢?确定没出去溴酚蓝还在而且分子量6000bp会不会于电泳槽有关我的是丙烯酰胺的垂直电泳槽
邓金权回答:
  个人感觉EB的检出限是约10ng/带,如果你的DNA样品不是纯的单一片段,很可能检测不出带,最好还是提高浓度。
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