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如图所示质粒PZHZ11(总长3.6kb,1kb=1000对碱基)中,lacZ基因编码β-半乳糖苷酶,后者催化生成化合物能将白色大肠杆菌染成蓝色(考虑目的基因和质粒正向和反向连接).(1)若先用限制酶B
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问题描述:

如图所示质粒PZHZ11(总长3.6kb,1kb=1000对碱基)中,lacZ基因编码β-半乳糖苷酶,后者催化生成化合物能将白色大肠杆菌染成蓝色(考虑目的基因和质粒正向和反向连接).

(1)若先用限制酶BamH I切开pZHZ11,然后灭活BamH I酶,再加DNA连接酶进行连接,最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含3.1kb质粒的细胞颜色为___;含3.6kb质粒的细胞颜色为___.

(2)若将两端分别用限制酶BamH I和Bgl II切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5kb的BamH I酶切片段,形成4.9kb的重组质粒,则目的基因长度为___kb.

(3)上述4.9kb的重组质粒有两种形式,若用BamH I和EcoR I联合酶切其中一种,只能获得1.7kb和3.2kb两种DNA片段;那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒,则获得的两种DNA片段长度为___kb.

(4)若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因,然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达,最后将产生的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥,那么上述过程属于___.

A.人类基因工程 B.动物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程.

万宇回答:
  (1)若先用限制酶BamHⅠ切开pZHZ11,然后灭活BamHI酶,则破坏了lacZ基因,导致β-半乳糖苷酶不能合成.而β-半乳糖苷酶催化生成的化合物能将变色的大肠杆菌染成蓝色,所以含3.1kb质粒的细胞颜色为白色;含3.6kb质粒的细胞中,如果lacZ基因能正常表达,则颜色为蓝色;如果lacZ基因不能正常表达,则颜色为白色.   (2)若将两段分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段,形成4.9kb的重组质粒,则目的基因长度为4.9-(3.6-0.5)=1.8kb.   (3)上述4.9kb的重组质粒有两种形式,若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种,只能获得1.7kb和3.2kb两种DNA片段,说明右侧BamHI和EcoRI之间的长度为1.7;用联合酶切同等长度的另一种重组质粒,则切割的是BamHI左侧的位点,可获得1.7+1.8=3.5kb和4.9-3.5=1.4kb两种DNA片段.   (4)由于将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并坚定目的基因,然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达,并将产物的药物单独注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥,所以该过程属于植物基因工程.   故答案为:   (1)白色   白色和蓝色/白色或蓝色   (2)1.8   (3)1.4、3.5   (4)C
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