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【(2014•闵行区一模)回答下列有关遗传信息传递和表达的问题.多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损.番茄果实成熟中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜.】
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问题描述:

(2014•闵行区一模)回答下列有关遗传信息传递和表达的问题.

多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损.番茄果实成熟中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜.利用基因工程的方法减少PG基因的表达,可延长果实保质期.科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入到番茄细胞中,得到转基因番茄,过程如图1所示.

(1)提取目的基因时,若已获取PG的mRNA,可通过______获取PG基因.在该基因上添加结构A可确保基因表达,在结构A上应具有______的结合位点.

(2)得到的目的基因两侧需人工合成BamHI单链末端.已知BamHI的识别序列如图2-甲所示,在图2-乙相应位置上,画出目的基因两侧的单链末端______.

(3)重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是______.

(4)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有______的培养基进行筛选.培养24~48h后取样,在质量分数为25%的蔗糖溶液中,观察细胞______现象来鉴别细胞壁是否再生.

(5)由于导入的目的基因能转录反义RNA,其能与______互补结合,抑制PG基因的正常表达.若转基因番茄的保质期比非转基因番茄______,则可确定转基因番茄成功.

(6)获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因,科研人员常采用______方法使子代保持转基因的优良性状.

江云波回答:
  (1)已获取PG的mRNA,可通过逆转法获得目的基因;基因表达包括转录和翻译两个步骤,为了确保基因表达,结构A应该具有RNA聚合酶的结合位点.(2)目的基因两侧需人工合成BamHI单链,已知BamHI的识别序列及切割位点为...
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