抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白，临床上主要用于血液性疾病的治疗．下图为培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程．回答问题：（1）已知抗凝血酶Ⅲ蛋白基因的碱基对序列，获得目
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问题描述：
抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白，临床上主要用于血液性疾病的治疗．下图为培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程．回答问题：
（1）已知抗凝血酶Ⅲ蛋白基因的碱基对序列，获得目的基因的方法是___，扩增抗凝血酶Ⅲ蛋白基因经常采用___技术．构建基因表达载体所用的工具酶有___、___．
（2）过程①是___，该过程常用的方法是___．选择受精卵作为目的基因的受体细胞的主要原因是___；过程②包括___ 技术和胚胎移植技术；可用
___技术获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊．
（3）对胚胎进行分割移植时，胚胎应发育到___或___阶段．胚胎在受体内存活的原因，可能是受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生___反应．对受体动物的处理是用___进行同期发情处理．
（4）若要检测牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白，可采用___技术．
（5）如果检测发现抗凝血酶Ⅲ蛋白基因被导入了受精卵，但却没有检测到抗凝血酶Ⅲ蛋白的存在，那应该考虑分别位于目的基因首端和端的___没有设计好，应从这方面考虑改善．
唐劲松回答：
（1）已知抗凝血酶Ⅲ蛋白基因的碱基对序列，可以从基因文库中获取或利用PCR技术扩增获取目的基因，利用PCR技术能在体外大量扩增目的基因（抗凝血酶Ⅲ蛋白基因）．基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割目的基因和运载体，DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．
（2）过程①是将目的基因导入受体细胞，常用的方法是显微注射法．利用PCR技术能扩增抗凝血酶Ⅲ蛋白基因．过程②是受精卵需要经过早期胚胎培养技术和胚胎移植技术，可用胚胎分割技术获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊．
（3）胚胎移植时，受体应处于适合的生理状况，此时可利用促性腺激素对受体进行同期发情处理．此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．一般等到胚胎发育到桑葚胚或囊胚时，进行胚胎移植．
（4）若要检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，这属于翻译水平的检测，可采用抗原-抗体杂交技术．
（5）基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成．启动子位于首端，终止子位于尾端．
故答案为：
（1）以从基因文库中获取或利用PCR技术扩增 PCR技术 限制酶 DNA连接酶
（2）将目的基因导入受体细胞 显微注射法 受精卵的全能性最高 早期胚胎培养（或“动物细胞培养”） 胚胎分割
（3）桑葚胚或囊胚 免疫排斥反应 促性腺激素对受体
（4）抗原-抗体杂交
（5）启动子和终止子
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