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【科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问】
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问题描述:

科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。

(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增,该技术须用________酶,所需的原料是________。

(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表):

限制酶

BamHⅠ

Hind Ⅲ

EcoR Ⅰ

Sma Ⅰ

识别序列及

切割位点

用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ酶切割,原因是

__________________________________________________________________

_________________________________________________________________。

图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。

(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。

(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是___________________________________________________。

 

孙红娟回答:
  (1)耐热的DNA聚合 四种脱氧核苷酸   (2)Sma Ⅰ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 BamH Ⅰ和Hind Ⅲ (3)脱分化 再分化   (4)抗盐基因(或目的基因) 将培育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤中,观察该烟草植株的生长状态
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