如图是获得转基因番茄的技术流程，kanR为卡那霉素抗性基因，番茄叶片对卡那霉素高度敏感，请据图回答：（1）构建重组质粒时至少用到___种工具酶，其中限制酶作用的化学键是___；能将DN
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问题描述：
如图是获得转基因番茄的技术流程，kanR为卡那霉素抗性基因，番茄叶片对卡那霉素高度敏感，请据图回答：
（1）构建重组质粒时至少用到___种工具酶，其中限制酶作用的化学键是___；能将DNA片段之间的平末端拼接在一起的是___酶．
（2）在完整的重组质粒中卡那霉素抗性基因视为___，要筛选出含目的基因的受体细胞，需要在培养基中加入的试剂是___．
（3）图中将目的基因导入番茄细胞的方法为___；检测转基因植株是否培育成功的方法是___．
（4）基因工程获得的是含有抗虫基因的细胞，要获取转基因抗虫植株还需用到___技术．
胡俊回答：
（1）构建重组质粒的过程中需要用到的工具酶为限制性核酸内切酶（切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒）和DNA连接酶（将目的基因和质粒连接形成重组质粒），其中限制酶能够使磷酸二酯键断裂；DNA连接酶根据来源分为两类：T4DNA连接酶和E•coli DNA连接酶，其中E•coliDNA连接酶只能连接双链DNA的黏性末端，而T4DNA连接酶既可以连接双链DNA的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA的齐平末端．
（2）在完整的重组质粒中，卡那霉素抗性基因属于标记基因，要筛选出含目的基因的受体细胞，需要在培养基中加入卡那霉素．
（3）图中将目的基因导入番茄细胞的方法为农杆菌转化法；检测转基因植株是否培育成功的方法是抗虫接种试验．
（4）基因工程获得的是含有抗虫基因的细胞，要获取转基因抗虫植株还需用到植物组织培养技术．
故答案为：
（1）2 磷酸二酯键 T4DNA连接
（2）标记基因 卡那霉素
（3）农杆菌转化法 抗虫接种试验
（4）植物组织培养
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