多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损．成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜．利用第基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学家
1人问答
问题描述：
多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损．成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜． 利用第基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图．据图回答下列问题：
（1）若已获取PG的mRNA，可通过___获取PG基因．
（2）改造过程需要用到的工具有___，若得到的目的基因两侧需人工合成BamHⅠ黏性末端，己知BamHⅠ的识别序列如下图甲所示，请在答题纸上图乙相应位置画出目的基因两侧的黏性末端．
___
（3）在该基因上游加结构A可确保基因的反义转录，结构A上应具有___酶结合位点，在该番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做___．
（4）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有___的培养基进行筛选．之后还需将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞___现象来鉴别细胞壁是否再生．
（5）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用___技术，该技术操作过程中除营养物质外还必须向培养基中添加___．
（6）若转基因番茄的保质期比非转基因番茄___（填“长”或“短”），则可确定转基因番茄成功．
陈永志回答：
（1）以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录，所以若已获取PG的mRNA，可通过逆转录法获取PG基因．
（2）基因工程中改造过程需要用到的工具有限制酶、DNA连接酶和质粒，若得到的目的基因两侧需人工合成BamHⅠ黏性末端，根据BamHⅠ的识别序列，可知目的基因两侧的黏性末端为：
（3）基因转录的产物是mRNA，在转录时需要RNA聚合酶．在该基因上游加结构A可确保基因的反义转录，结构A上应具有RNA聚合酶结合位点，在该番茄新品种的培育过程中，常用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞．
（4）由图可知，重组质粒中含卡那霉素抗性基因而四环素抗性基因被破坏，因此用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有卡那霉素的培养基进行筛选．之后还需将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞是否发生质壁分离现象来鉴别细胞壁是否再生．
（5）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用植物组织培养技术，该技术操作过程中除营养物质外还必须向培养基中添加植物激素即生长素和细胞分裂素．
（6）若转基因番茄的保质期比非转基因番茄长，则可确定转基因番茄成功．
故答案为：
（1）逆转录（或cDNA文库）
（2）限制酶、DNA连接酶和质粒
（3）RNA聚合 农杆菌转化法
（4）卡那霉素 是否发生质壁分离
（5）植物组织培养 植物激素
（6）长
科学推荐
科学推荐
最新更新
精品分类
优秀科学推荐
热门科学
邮箱： 