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【如图为单克隆抗体制备流程示意图.(1)单克隆抗体制备技术的基础是___.(2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是___.(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从H】
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问题描述:

如图为单克隆抗体制备流程示意图.

(1)单克隆抗体制备技术的基础是___.

(2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是___.

(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/ml,每孔滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是___.

(4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是___.

(5)单克隆抗体的化学本质___,产生细胞___.

(6)第二次筛选的方法___,筛选的目的___.

史金飞回答:
  (1)单克隆抗体制备的技术涉及动物细胞融合和动物细胞培养,基础是动物细胞培养.   (2)据图分析,骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长,所以骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞也不能在该培养基上存活;淋巴细胞和淋巴细胞自身融合的细胞能在HAT培养基上正常生活,但不能增殖,所以经过培养后,HAT培养基上没有淋巴细胞和淋巴细胞自身融合的细胞;骨髓瘤细胞与淋巴细胞之间形成的杂交瘤细胞能在HAT培养基上正常生活,并无限增殖.   (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/mL,每孔滴入0.1mL细胞稀释液,其目的是使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的(或单一细胞培养以保证抗体的纯度).   (4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,单克隆抗体是分泌蛋白质,首先在核糖体中合成,在内质网上初步加工,之后内质网边缘以“出芽”形式冒出囊泡,囊泡离开内质网,转移到高尔基体上,与高尔基体膜融合,囊泡中的物质也进入到高尔基体中,在高尔基体中进一步加工成成熟的蛋白质,高尔基体膜也突起形成小泡,小泡离开高尔基体,转移到细胞膜上,小泡中物质释放到细胞膜外.因此放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜.   (5)单克隆抗体的化学本质蛋白质,由杂交瘤细胞合成并分泌.   (6)第二次筛选是通过抗体检测的方法,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞.   故答案为:   (1)动物细胞培养    (2)筛选杂交瘤细胞   (3)使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的(或单一细胞培养以保证抗体的纯度)   (4)核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜   (5)蛋白质      杂交瘤细胞   (6)抗体检测     筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞
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