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定点突变技术是指利用PCR等技术向目的DNA片段中引入所需变化,包括碱基的添加、删除、点突变等方法.如图示利用定点突变技术获得突变质粒的过程,请结合图示回答问题:(1)基因工
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问题描述:

定点突变技术是指利用PCR等技术向目的DNA片段中引入所需变化,包括碱基的添加、删除、点突变等方法.如图示利用定点突变技术获得突变质粒的过程,请结合图示回答问题:

(1)基因工程中使用的载体除质粒外,还可以用___和___.

(2)在定点突变的过程中,需用含有突变位点的人工DNA片段作为___.PCR过程中还需要___、模板、___等条件.

(3)甲基化酶Dpn I可以选择性降解质粒模板,说明该酶具有___.

(4)定点突变技术可以用于以下的___.

①研究某些氨基酸残基对蛋白质结构的影响

②获得符合人们需要的蛋白药物、基因工程酶

③修饰基因表达载体

④给基因表达载体引入新的酶切位点

(5)若要将含有突变位点的质粒导入大肠杆菌中,首先需要用___处理大肠杆菌细胞使其处于感受态,然后将质粒溶于___中与感受态细胞混合,在一定温度下促使其转化.

潘柏英回答:
  (1)基因工程中常使用的载体有质粒、λ噬菌体(的衍生物)和动植物病毒.   (2)在定点突变的过程中,需用含有突变位点的人工DNA片段作为引物,引导子链合成.PCR过程中还需要原料(脱氧核苷酸)、模板(DNA链)、耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等条件.   (3)甲基化酶Dpn I可以选择性降解质粒模板,说明该酶具有专一性或特异性性.   (4)①定点突变技术可以用于研究某些氨基酸残基对蛋白质结构的影响,①正确;   ②定点突变技术可以用于获得符合人们需要的蛋白药物、基因工程酶,②正确;   ③定点突变技术可以用于修饰基因表达载体,③正确;   ④定点突变技术可以用于给基因表达载体引入新的酶切位点,④正确.   (5)若要将含有突变位点的质粒导入大肠杆菌中,首先需要用Ca2+处理大肠杆菌细胞使其处于感受态,然后将质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定温度下促使其转化.   故答案为:   (1)λ噬菌体(的衍生物)  动植物病毒   (2)引物  原料  耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)   (3)专一性或特异性   (4)①②③④   (5)Ca2+   缓冲液
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