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糖尿病目前的治疗途径之一是注射胰岛素,胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一.图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(
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问题描述:

糖尿病目前的治疗途径之一是注射胰岛素,胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一.图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白).请回答下列问题:

(1)根据图1,基因表达载体中没有标注出来的基本结构是___.

(2)图1中启动子是___酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达,氨苄青霉素抗性基因的作用是___.

(3)人胰岛素由A、B两条肽链组成,可裉据组成肽链的氨基酸序列,确定编码胰岛素基因的碱基序列,再通过___方法获得目的基因.

(4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肱链上蛋白醅的切割位点隐藏在内部,其意义在于___.

(5)β-半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸,而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸,溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白的目的是___.

黎辉勇回答:
  (1)根据题意和图示分析可知:图1基因表达载体中已有目的基因、启动子和标记基因,所以没有标注出来的基本结构是终止子.   (2)图1中启动子是RNA聚合酶酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达即转录过程;氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因,将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来.   (3)人胰岛素由A、B两条肽链组成,可根据组成肽链的氨基酸序列,确定编码胰岛素基因的碱基序列,因此可通过人工合成(化学合成)方法获得目的基因.   (4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,这样可以防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解.   (5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,由于β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸,而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸,所以用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链.   故答案为:   (1)终止子   (2)RNA聚合   作为标记基因,将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来   (3)人工合成(化学合成)   (4)防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解   (5)获得完整的胰岛素的A链和B链
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