表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点.请回答下列问题:
识别序列及切割位点 | GAAT↓TAATTC CTTAATT↑TAAG | G↓TGCAG GACGT↑C | G↓AATTC CTTAA↑G | CCC↓GGG GGG↑CCC |
A.DNA自我复制B.DNA以其一条链为模板合成RNA
C.RNA自我复制D.按照RNA上密码子的排列顺序合成蛋白质
(2)若图2中目的基因D需要同时使用MetⅠ和PstⅠ才能获得,而图1所示的质粒无相应的限制酶酶切位点.所以在该质粒和目的基因构建重组质粒时,需要对质粒改造,构建新的限制酶酶切位点.试帮助完成构建需要的限制酶酶切位点的思路(选填①-⑤):
①EcoRⅠ②MetⅠ③PstⅠ④DNA连接酶⑤DNA聚合酶
首先用___处理质粒;然后用___处理质粒,使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸;再用___处理质粒,形成了的限制酶酶切割位点,它可被②识别.
(3)检测筛选是一个重要步骤.图3表示在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种方法与培养方法,以检测基因表达载体是否导入大肠杆菌.培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有___.从筛选结果分析,含目的基因的是___(填编号)菌落中的细菌.
(4)DNA分子中,一条链的两个核苷酸通过___连接.如要检测目的基因是否成功表达,须提取培养后大肠杆菌解的___,用相应抗体检测.