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(2011•普陀区二模)在基因工程中通常需要利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR如右图示,包括三个基本反应步骤
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问题描述:

(2011•普陀区二模)在基因工程中通常需要利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR如右图示,包括三个基本反应步骤:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后双链解离;②模板DNA与引 物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,合成一条新的与模板DNA 链互补的脱氧核苷酸链.重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得较多的目的基因.

(1)温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物时所遵循的原则是______.

(2)在PCR技术中,引物的作用是______.

(3)从理论上推测,第三轮循环产物中含有引物B的DNA片段所占比例为______.

(4)下图表示利用PCR技术获取目的基因X的第一次循环产物.则至少需要在______轮循环产物中才能开始出现独立且完整的X基因.如果经过n次循环,则产物中①所示DNA分子数为______.

(5)用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒,得到DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对),请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点.

李善亮回答:
  (1)温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链之间遵循碱基互补配对原则结合形成DNA模板--引物结合物.(2)在PCR技术中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作...
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