当前位置 :
【DNAbindingBuffer中的poly-dIdC是什么有什么作用?分子生物学中,看到DNA-蛋白相互作用实验中用到了DNAbindingBuffer,其中的poly-dIdC是什么有什么作用?】
1人问答
问题描述:

DNAbindingBuffer中的poly-dIdC是什么有什么作用?

分子生物学中,看到DNA-蛋白相互作用实验中用到了DNAbindingBuffer,其中的poly-dIdC是什么有什么作用?

崔中兴回答:
  poly(dI:dC)(dI:dC),非特异性竞争DNA,特异性竞争DNA的功能是什么?   它由肌苷和胞嘧啶组成.由于其特定的结构,可抑制蛋白对标记探针的非特异结合,避免假复合物.在凝胶迁移反应中加入poly(dI:dC)(dI:dC),可抑制粗制核抽提液中其它DNA结合蛋白结合,比如转录调节因子的非特异结合.当用纯化的蛋白作凝胶迁移反应时,不必一定加入poly(dI:dC)(dI:dC),如加入,则普通反应中所用终浓度不超过50-100ng.对核抽提液,每2-3ug核抽提液用1ugpoly(dI:dC)(dI:dC).为确定所形成的复合物的特异性,在含或不含增量的非放射性的特异竞争DNA或非特异的竞争DNA时,作结合反应的竞争实验.一般,非放射性的特异DNA是非标记的DNA探针,非特异的竞争DNA,长度组成和DNA探针相同,序列不同.用非放射性的特异DNA能竞争掉,而用非特异的竞争DNA不能竞争掉的复合物,表明目的蛋白和同位素标记探针的特异结合.非特异结合能用特异DNA和非特异的竞争DNA竞争掉.结合溶液中的poly(dI:dC)(dI:dC)的量需作优化,但一般用0.05mg/ml.非放射性的(特异或非特异)的竞争DNA的用量也需优化或滴定,但竞争DNA通常是同位素标记的探针的10-1000倍(w/w).其他类型的竞争DNA如小牛胸腺DNA不能用于凝胶迁移反应,它们会带有目的蛋白的结合位点.
最新更新
PC端 | 移动端 | mip端
字典翻译(zidianfy.com)汇总了汉语字典,新华字典,成语字典,组词,词语,在线查字典,中文字典,英汉字典,在线字典,康熙字典等等,是学生查询学习资料的好帮手,是老师教学的好助手。
声明:本网站尊重并保护知识产权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果我们转载的作品侵犯了您的权利,请在一个月内通知我们,我们会及时删除。
电话:  邮箱:
Copyright©2009-2021 字典翻译 zidianfy.com 版权所有 闽ICP备2022014709号-7
lyric 頭條新聞