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【通常情况下,PCR体系中各试剂加入量的依据是什么?】
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问题描述:

通常情况下,PCR体系中各试剂加入量的依据是什么?

黄继雄回答:
  依据经验吧   25~50mMKCl——促进引物退火,>50mM会抑制Taq酶的活性.   10~50mMTris•Cl(pH8.4)——维持Taq酶作用环境的偏碱性   1.5mMMgCl2——Mg2+是Taq酶活性所必须的金属离子.Mg2+浓度的高低能影响反应的特异性和扩增片段的产率.0.5~5mMMg2+是比较合适的.   100μg/ml牛血清白蛋白(BSA)——对酶有一定的保护性   这些都是多次实验的基础上得出的   当然,不同类型的pcr需要的浓度有所差异
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