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关于鲑鱼精DNA浓度的确定我现在在做核酸分子杂交,想请问各位鲑鱼精DNA在经过酚抽提、剪切、沉淀和重溶后,要通过测定溶液OD260值然后计算精确的DNA浓度,这一步我不知道该怎么确定它的浓
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问题描述:

关于鲑鱼精DNA浓度的确定

我现在在做核酸分子杂交,想请问各位鲑鱼精DNA在经过酚抽提、剪切、沉淀和重溶后,要通过测定溶液OD260值然后计算精确的DNA浓度,这一步我不知道该怎么确定它的浓度啊?是怎么计算啊?在测出OD260的值后,要使用什么公式计算啊?

请问剪切前和剪切后浓度不会有变化吧?

刘雪宁回答:
  要先做出一个标准曲线(standardcurve)   拿不同浓度的DNA(由小到大,有梯度.自己做一个serialdilution)都测量一个OD260值.然后画曲线(其实是直线).然后可以算出一个一元直线的   方程.然后看你的sample的OD260在那里就可以(就是代入方程算浓度).   其实有专门的软件的.一般买光谱仪都带那种软件的.用软件很方便的
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