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如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图1中分别表示:tetR为四环素抗性基因,ampR为氨苄青霉素抗性基因,以及BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ三种限制酶的酶切位点.据图回答:
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问题描述:

如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图1中分别表示:tetR为四环素抗性基因,ampR为氨苄青霉素抗性基因,以及BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ三种限制酶的酶切位点.据图回答:

(1)图1中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用___限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因.能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是___.过程①可采用的操作方法是___.为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用___技术.

(2)过程②采用的生物技术是___.在此之前,需要对代孕牛经过___处理后,使之与供体的生理状况保持相同.如果对胚胎进行性别鉴定,可选用囊胚期的___细胞进行鉴定.

(3)用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如图2所示).图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础.

①PCR技术扩增目的基因时从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为___.

②在第___轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段.

何玉彬回答:
  (1)外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位点,其中限制酶SmaI的切割位点位于目的基因上,所以获取目的基因和构建基因表达载体时,应用限制酶HindⅢ和BamHⅠ.启动子是能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列.过程①是将重组质粒导入受体细胞,当受体细胞是动物细胞时,将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法.为检测目的基因是否成功表达,可采用抗原-抗体杂交技术.   (2)过程②需要采用胚胎移植技术;胚胎移植前需要用相关激素对受体进行同期发情处理,使之与供体的生理状况保持相同;鉴定性别时,可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定.   (3)①由图可知,由原来的每条母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B,而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时,两种引物都含有,故第四轮循环共产生16个DNA分子,其中含有引物A的分子是15个,占1516
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《如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图1中分别表示:tetR为四环素抗性基因,ampR为氨苄青霉素抗性基因,以及BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ三种限制酶的酶切位点.据图回答:|初中生物问答-字典翻译问答网》
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