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水稻纹枯病是一种真菌性病害,在我国长江流域和南方的一些省区居水稻病害之首.土壤中某些拮抗微生物与水稻纹枯菌共培养时会形成抑菌圈,为水稻纹枯病生物防治提供了重要依据.科
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批八字六道轮回八字精批五行盈缺
问题描述:

水稻纹枯病是一种真菌性病害,在我国长江流域和南方的一些省区居水稻病害之首.土壤中某些拮抗微生物与水稻纹枯菌共培养时会形成抑菌圈,为水稻纹枯病生物防治提供了重要依据.科研人员进行了以下研究,请回答相关问题:

(1)筛选菌株

水稻纹枯菌的拮抗微生物可从水稻田采集水稻组织或___进行筛选,将所取样品每份称取5g放入液体培养基中培养24h后,取适量培养液涂布于琼脂平板上,培养5天后,挑选形态不同的___,对其进行编号.然后挑取少许菌株分别接种于长满水稻纹枯菌的琼脂平板上,培养3天后,观察纹枯菌的生长,根据___选出某理想菌株,编号为T4.

(2)鉴定菌株T4所属的细菌类型

提取菌株T4基因组DNA,扩增其16S rDNA(能体现不同菌属之间的差异,长度接近1000个碱基对).已知PCR扩增过程中,耐高温的DNA聚合酶合成子链的效率约为每分钟形成1000个磷酸二酯键,则对PCR扩增仪进行程序设定时,应将每轮循环的延伸时间定为___,对扩增产物___后确定该菌株所属细菌类型.

(3)探究菌株T4的生长和抑菌活性物质产生的最适条件

研究小组将菌株T4的单菌落接种至液体培养基中,振荡培养,分别于不同起始 pH、不同培养温度下测定细菌的生长量和抑菌效果,其中细菌生长量测定采用分光光度法,吸光度(OD值)和样本溶液浓度成正比.本实验于波长为640nm处记录菌液的吸光度(OD640),得到如下曲线:

由图可知,菌株的最适生长条件为:___,与其抑菌活性物质产生的最适条件___.(一致/不一致)

(4)菌种保存

为了长期保存菌株T4,可在3mL的甘油瓶中,装入1mL甘油后___处理,再将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中,放在冷冻箱中长期保存.

施建安回答:
  (1)水稻纹枯菌的拮抗微生物可从水稻田采集水稻组织或土壤进行筛选.单菌落是由一个并且是一种细菌增殖而来,因此培养基培养5天后,挑选形态不同的单菌落,对其进行编号.然后挑取少许菌株分别接种于长满水稻纹枯菌的琼脂平板上,抑菌圈越大说明该微生物抑制纹枯菌的能力越强,因此可以根据抑菌圈的大小选出某理想菌株.   (2)分析题意可知,16SrDNA的长度接近1000个碱基对,而耐高温的DNA聚合酶合成子链的效率约为每分钟形成1000个磷酸二酯键,即接近16SrDNA的长度,因此对PCR扩增仪进行程序设定时,应将每轮循环的延伸时间定为1min,对扩增产物测序后确定该菌株所属细菌类型.   (3)根据题意可知,“吸光度(OD值)和样本溶液浓度成正比”,曲线中看出起始pH7.0,培养温度32℃时吸光度最大,因此该条件为菌株的最适生长条件,而其抑菌活性物质产生的最适条件为PH6.0,培养温度为28℃.   (4)为了长期保存菌株T4,可在3mL的甘油瓶中,装入1mL甘油后灭菌处理,再将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中,放在冷冻箱中长期保存.   故答案为:   (1)土壤   单菌落   抑菌圈的大小   (2)1min   测序   (3)起始pH 7.0,培养温度32℃不一致   (4)灭菌
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