关于质粒亚克隆的一些问题
有一个以前师兄留下来的质粒,不知道是什么载体的,只知道是HA标签,现在因为想用它做GST-pulldown,所以要把质粒克隆到GST载体上,预计是使用两种酶进行双酶切,本人几乎没怎么做过克隆,所以想请教一下,具体细节步骤应该要怎么做?
PS:需要设计引物先PCR再酶切?还是用选定的两种酶直接把原质粒来进行酶切?