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【pcr扩增没有条带我用别人肯定能作出来...>
【pcr扩增没有条带我用别人肯定能作出来的ISSR体系扩增之后为什么什么条带都没有呢,感觉药品应该没有问题.将DNA稀释100倍后用紫外分光光度计测DNAod260/2801.8左右,符合要求呀,电泳检测只是轻】
1人问答
问题描述：

pcr扩增没有条带

我用别人肯定能作出来的ISSR体系扩增之后为什么什么条带都没有呢,感觉药品应该没有问题.将DNA稀释100倍后用紫外分光光度计测DNAod260/2801.8左右,符合要求呀,电泳检测只是轻微拖尾,条带挺亮的,是不是测得DNA浓度不对呢?还有我用的是纯水不知道有没有影响?

罗伟林回答：
网友采纳
　　SSR用4%PAGE胶检测,加样时一定要注意最后分开加的引物家进去了,而且够量(0.5ul是很少的,要注意).我用的PCR程序是94度10分钟,94度35秒.55度35秒,72度45秒,35循环,最后再10分钟的72度. 　　你测到的1.8只是说明DNA比较纯,也许模板浓度不够啊,要达到5ng/ul以上才好用,模板浓度太低也扩不出来的. 　　你跑胶之后有没有引物二聚体的带,如果有,说明模板加的正常,如果没有,可能是加模板没加好. 　　水只要用灭菌的纯水就行了,没什么的,师兄都说PCR是很粗放,很简单的.加油!
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