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【小麦淀粉酶活力是多少?那是中国历史网啊,没有我要的答案啊】
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小麦淀粉酶活力是多少?

那是中国历史网啊,没有我要的答案啊

付卫强回答:
  【方法】   1.酶液提取:称取25℃下萌发3~4天的小麦种子1.0g(芽长1.1.5cm),置研钵中,加少量石英砂和2ml蒸馏水,研磨成匀浆后转入离心管中,用7ml蒸馏水分次将残渣洗入离心管提取液在室温下放置提取15~20min,每隔数分钟搅动1次,使其充分提取.   然后在3000rpm转速下离心10min,将上清液倒入50ml容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,摇匀,即为淀粉酶原液.吸取上述淀粉酶原液5ml,放入50ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度摇匀,即为淀分酶稀释液.   2.麦芽糖标准曲线制作:取7支干净的具塞刻度试管,编号,按表33-1加入试剂.   表33-1制作麦芽糖标准曲线配方表   试剂管号   1234567   麦芽糖标准液(ml)00.20.40.81.2.1.62.0   蒸馏水(ml)2.01.81.61.20.80.40   麦芽糖含量(mg)00.20.40.81.21.62.0   3,5-二硝基水杨酸(ml)2222222   摇匀,置沸水中浴中煮沸5min.取出后流水冷却,加蒸馏水定容至20ml.以1号管作为空白调零点,在540nm波长下比色测定.以麦芽糖含量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线.   3.酶活力的测定:取6支干净的具塞刻度试管,编号,按表33-2进行操作.   表33-2配活力的测定配方表   操作项目管号   Ⅰ-1Ⅰ-2Ⅰ-3Ⅱ-1Ⅱ-2Ⅱ-3   淀粉酶原液(ml)1.01.01.0000   钝化β-淀粉酶置70℃水浴中15min,取出后在流水中冷却   淀粉酶稀释液(ml)000111   DNS试剂(ml)2.0002.000   预保温40℃恒温水浴中保温10min   1%淀粉溶液(ml)(40℃)1.01.01.01.01.01.0   保温40℃恒温水浴中准确保温5min   DNS试剂(ml)02.02.002.02.0   摇匀,置沸水浴中5min,取出后冷却,加蒸馏水至20ml.摇匀,在540nm波长下比色,记录测定结果.   4.结果计算:用Ⅰ-2、Ⅰ-3吸光度平均值与Ⅰ-1吸光度值之差,在标准曲线上查出相应的麦芽糖含量(mg),再按下式计算α-淀粉酶的活力(Aα),淀粉酶活性以麦芽糖mg·g-1·min-1表示:   Aα=   Ⅱ-2、Ⅱ-3吸光度平均值与Ⅱ-1吸光度值之差,在标准曲线上查出相应的麦芽糖含量(mg),按下式计算(α+β)-淀粉酶总活力AT:   AT=   式中A—淀粉酶活性,Aα为α-淀粉酶的活性,AT为淀粉酶总活性,主要是α、β淀粉酶的活性;   Cα—α-淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖量(查标准曲线求值,以下同);   CT—(α+β)淀粉酶共同水解淀粉生成的麦芽糖量;   V1—显色所用酶液体积(ml);   t—酶作用时间(min);   Vt—样液稀液总体积(α-淀粉酶为50ml,α+β淀粉酶为500ml);   FW—样品鲜重(g).
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