【科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达．从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株--抗虫棉．其过程大致如下图所示：（1）基因工】
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问题描述：
科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达．从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株--抗虫棉．其过程大致如下图所示：
（1）基因工程的四个操作步骤是：目的基因的获取、___、___、目的基因的检测与表达．
（2）获取Bt毒蛋白基因的方法一般有直接分离法（鸟枪法）、___等．
（3）一个基因表达载体的组成有启动子、终止子、目的基因和___等．
（4）将目的基因导人受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是___．
（5）检测基因工程是否成功，在DNA水平上鉴定的方法是___在蛋白质水平上鉴定的方法是___
（6）大面积种植抗虫棉会对该地区生态平和造成怎样的影响？___．
孙全性回答：
（1）基因工程的四个操作步骤包括：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达．
（2）目的基因的获取方法一般有从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因、人工合成法．
（3）一个基因表达载体的组成有启动子、终止子、目的基因和标记基因等．
（4）将目的基因导入受体细胞的方法很多，图中利用了农杆菌转化法将目的基因导入棉花细胞中．
（5）目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA分子上．这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是DNA分子杂交技术．若从个体水平可以用抗虫的接种实验来进行检测．
（6）大面积种植抗虫棉，会破坏该地区食物链，影响生物多样性．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞
（2）人工合成法
（3）标记基因
（4）农杆菌转化法
（5）DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交
（6）破坏食物链，影响生物多样性
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