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科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达但在进行基因工程的操作过程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已
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问题描述:

科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达但在进行基因工程的操作过程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-GGATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-GATC-,据图回答:

(1)过程①表示的是采取______的方法来获取目的基因.

(2)根据图示分析,在构建基因表达载体过程中,应用限制酶______切割质粒,用限制酶______切割目的基因.用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过______原则进行连接.

(3)人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组,原因是______.

(4)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为______.写出目的基因在细菌中表达的过程______.

(5)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的说明已导入了______,反之则没有导入.

蒋异回答:
  (1)过程①是以mRNA为模板形成基因的过程,属于反转录,此过程需要逆转录酶的参与.   (2)在构建基因表达载体时,需用限制酶对目的基因和质粒进行切割以形成相同的黏性末端.质粒如果用限制酶Ⅱ来切割的话,将会在质粒在出现两个切口且抗生素抗性基因全被破坏,故质粒只能用限制酶Ⅰ切割(破坏四环素抗性而保留氨苄青霉素抗性,即将来形成的重组质粒能在含氨苄青霉素的培养基中生存,而在含四环素的培养基中不能生存);目的基因两端都出现黏性末端时才能和质粒发生重组,故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割时,才会在两端都出现黏性末端.黏性末端其实是被限制酶切开的DNA两条单链的切口,这个切口上带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好通过碱基互补配对进行连接.   (3)来源不同的DNA之所以能发生重新组合,主要原因是两者的结构基础相同,都是双螺旋结构,基本组成单位都是脱氧核苷酸等.   (4)所有的生物都共用一套密码子,所以人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达,过程是生长激素基因→mRNA→生长激素.   (5)因本题上有2个标记基因,但抗四环素基因被插入的基因破坏掉,因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因,如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长,说明已经导入了重组质粒或普通质粒A,因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因.   故答案为:   (1)反转录(人工合成)    (2)ⅠⅡ碱基互补配对   (3)人的基因与大肠杆菌DNA分子的双螺旋结构相同   (4)共同一套(遗传)密码子 生长激素基因→mRNA→生长激素   (5)普通质粒或重组质粒(缺一不可)
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