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【科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪.其基本流程是:首先从荧光水母中获取目的基因,然后与有关载体重组,并将其导入猪胎儿的成纤维细胞,经培养】
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问题描述:

科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪.其基本流程是:首先从荧光水母中获取目的基因,然后与有关载体重组,并将其导入猪胎儿的成纤维细胞,经培养后再将成纤维细胞移植入去核的卵母细胞中,最后培养出转基因克隆猪.请回答有关问题:

(1)科学家从荧光水母细胞中获取绿色荧光蛋白基因所运用的酶称为___,并用___的该种酶去作用于运载体,才能有利于重组载体的构建.

(2)基因工程中,将重组载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是___.

(3)作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在___期,常通过___(物理方法)进行激活,使其完成细胞分裂和发育进程.

(4)培养重组细胞时,将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为合成培养基,但通常在培养基中还需要加入适量的___等天然成分.

(5)重组细胞培养至一定阶段还可通过___的方法,从而最终一次获得多个转基因猪.最后这个过程现阶段必须通过胚胎移植才能实现,其实质是___.

曹进德回答:
  (1)限制酶切割DNA片段,获取绿色荧光蛋白基因.并用同种限制酶去作用于运载体,让它产生与目的基因相同的粘性末端,有利于重组载体的构建.   (2)基因工程中,将重组载体导入动物细胞常用的方法是显微注射法.   (3)受体细胞常选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞大,容易操作;卵(母)细胞质多,营养丰富;含有促使细胞全能性表达的物质.选取处在MⅡ中(减数第二次分裂中)期的去核卵母细胞作为受体细胞的,通过电脉冲(或电刺激)进行激活,使其完成减数分裂和发育进程.   (4)培养图示重组细胞时,将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为合成培养基.动物细胞所需的营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质.通常在培养基中还需要加入适量的血清(或血浆)等天然成分.   (5)胚胎分割采用机械方法将早期胚胎切割,经移植获得同卵双胚或多胚,从而获得较多基因型相同的转基因猪.图示重组细胞培养至桑椹胚或囊胚,可通过胚胎分割、胚胎移植方法,从而一次获得多个转基因猪.过程⑧是胚胎移植过程,其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移.   故答案为:   (1)限制酶    同种    (2)显微注射法   (3)MⅡ中(减数第二次分裂中)  电脉冲(或电激)   (4)血清(或血浆)   (5)胚胎分割、胚胎移植     早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
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