【为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA，科研人员比较了A方法（通过CTAB裂解细胞，并与蛋白质形成复合物）、B方法（通过SDS裂解细胞释放核DNA，使蛋白质变性）、C方法（通过高盐沉淀蛋】
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问题描述：
为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA，科研人员比较了A方法（通过CTAB裂解细胞，并与蛋白质形成复合物）、B方法（通过SDS裂解细胞释放核DNA，使蛋白质变性）、C方法（通过高盐沉淀蛋白质）从嫩叶、块根中提取总DNA的效果，主要实验步骤和相关检测结果如下，其中氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA不溶于氯仿-异戊醇，蛋白质等溶于氯仿-异戊醇．分析回答：
①将液氮冷冻的组织研磨成粉末
↓
②分别用A、B、C三种不同方法处理
↓
③DNA粗提液在65℃水浴保温60min，搅拌均匀
↓
④加氯仿-异戊醇，离心取？，加冷酒精，收集沉淀
↓
⑤加入RNA酶，37℃水浴保温20min，重复步骤④
↓
⑥将沉淀室温干燥后，溶于超纯水中，-20℃保存备用
结果检测
组织方法组别OD260/OD230OD260/OD280得率/μg•mg-1嫩叶块根| A方法 | A1 | 1.970 | 1.821 | 0.105 |
| B方法 | B1 | 1.973 | 1.719 | 0.096 |
| C方法 | Cl | 1.647 | 1.568 | 0.082 |
| A方法 | A2 | 1.888 | 1.888 | 0.029 |
| B方法 | B2 | 1.811 | 1.682 | 0.030 |
| C方法 | C2 | 1.376 | 1.320 | 0.020 |
（1）步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是___．步骤④“？”表示___．
步骤⑤中加RNA酶的作用是___．
（2）影响DNA纯度的物质主要有___．提取的DNA中RNA残留较多的方法是___．为材料提取DNA的得率较高，原因是___．
（3）电泳可以直观对比DNA的完整性，分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同，从而产生不同的条带．如图是上述实验中提取到的总DNA 凝胶电泳结果，其中M是已知大小的不同DNA的混合物．实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带，而C方法有明显的“拖尾”现象．
①只出现一条带的原因是___．
②出现“拖尾”现象的原因是___．
范培蕾回答：
（1）步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是使蛋白质变性．由于“氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA不溶于氯仿-异戊醇”，因此步骤④“？”表示上清液．RNA酶的作用是水解RNA，去除RNA杂质．
（2）影响DNA纯度的物质主要有蛋白质、RNA、小分子物质．根据题干信息“OD260/OD280比值大于1.8表示存在RNA残留”可知，提取的DNA中RNA残留较多的方法是A方法．细胞分裂过程中会进行DNA的复制，因此用细胞分裂旺盛的材料提取DNA的得率较高．
（3）①只出现一条带的原因是甜菜细胞基因组DNA分子都比较大，不容易分离．
②出现“拖尾”现象的原因是DNA发生断裂或降解，形成许多大小不等的DNA片段．
故答案为：
（1）使蛋白质变性 上清液 水解RNA，去除RNA杂质
（2）蛋白质、RNA、小分子物质 A方法 细胞分裂旺盛
（3）①甜菜细胞基因组DNA分子都比较大，不容易分离
②DNA发生断裂或降解，形成许多大小不等的DNA片段
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