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科学家运用基因工程技术将结核杆菌MPT64基因(能控制合成MPT64蛋白)成功导入胡萝卜细胞,最终表达出肺结核疫苗.请回答下列问题:(1)为获取MPT64基因,可从结核杆菌的细胞中提取对应
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问题描述:

科学家运用基因工程技术将结核杆菌MPT64基因(能控制合成MPT64蛋白)成功导入胡萝卜细胞,最终表达出肺结核疫苗.请回答下列问题:

(1)为获取MPT64基因,可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA,在___ 的作用下合成双链cDNA片段,获得的cDNA片段与结核杆菌中该基因碱基序列___(填“相同”或“不同”).

(2)通常采用PCR技术扩增MPT64基因,前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成___,在操作步骤中需要加热至90-95℃的目的是___.

(3)根据农杆菌的特点,如果将MPT64基因插入到___上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入胡萝卜细胞,并将其插入到植物细胞中的___上.要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达,应检测胡萝卜植株中是否含有___.

(4)研究发现,如果将MPT64蛋白20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸,其保存时间将大大延长,科学家可以生产上述耐储存的MPT64蛋白的现代生物工程技术是___.

李荷华回答:
  (1)获取目的基因的方法有反转录法,即可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA,在逆转录酶的作用下合成双链cDNA片段.获得的cDNA片段只包含基因的编码区,没有非编码区,因此与结核杆菌中该基因碱基序列不同.   (2)通常采用PCR技术扩增MPT64基因,前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物,在操作步骤中需要加热至90-95℃的目的是目的基因DNA受热变性解链为单链.   (3)根据农杆菌的特点,如果将MPT64基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入胡萝卜细胞,并将其插入到植物细胞中的染色体的DNA上.要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达,应检测胡萝卜植株中是否含有MPT64蛋白.   (4)研究发现,如果将MPT64蛋白20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸,其保存时间将大大延长,科学家可以生产上述耐储存的MPT64蛋白的现代生物工程技术是蛋白质工程.   故答案为:   (1)逆转录酶 不同   (2)引物 目的基因DNA受热变性解链为单链   (3)Ti质粒的T-DNA 染色体的DNA MPT64蛋白   (4)蛋白质工程
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