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【在免疫共沉淀过程中的问题~加蛋白标签我用加了GFP或者Myc标签的表达质粒表达蛋白,然后做CO-IP!用抗GFP抗体将复合物拉下来可以不?GFP会不会和细胞内其他蛋白相互作用也形成复合物而影响结】
1人问答
问题描述:

在免疫共沉淀过程中的问题~加蛋白标签

我用加了GFP或者Myc标签的表达质粒表达蛋白,然后做CO-IP!

用抗GFP抗体将复合物拉下来可以不?

GFP会不会和细胞内其他蛋白相互作用也形成复合物而影响结果啊?

我表达的目的蛋白是想筛选相互作用蛋白,通过把GFP拉下来,GFP连接了我的表达蛋白A,蛋白A可以把未知的蛋白X一起拉下来么?

加了GFP的会不会影响蛋白A的结构域啊?

沈嘉骅回答:
  你CO-IP的目的不是要目的蛋白么   GFP这种外源的一半不会和体内的蛋白相互作用   但是即使作用了你要的目的蛋白肯定会下来   管它其他的蛋白下不下来呢
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